全套抗体标记工具-全套抗体和蛋白质标记试剂盒的使用

       用特定标签标记抗体已成为生物科学和医学研究中的重要且常规程序，标签的范围从视觉标记（例如荧光染料）到半抗原分子（例如生物素），标签的作用有增强免疫复合物和蛋白质-蛋白质相互作用的可见性，以及用于蛋白质的分离和纯化。

 

       在确定选择哪种标签类型时，应侧重于抗体的下游应用。荧光标签主要用于细胞成像，流式细胞仪，荧光印迹和免疫荧光应用，而酶标（例如HRP和AP）通常用于WB，ELISA和IHC应用。Hapten标签（例如生物素）在可能的标签选项中用途更为广泛，因为它们可用于蛋白质分离和纯化以及任何上述应用。

 

       下面我们为您提供了全套抗体和蛋白质标记试剂盒供您选择。这些试剂盒是专为初学者设计的，具有最简单的操作规程和最少的操作步骤。

 

 

       各类抗体标记试剂盒一览
 

抗体标记试剂盒	ReadiLink™ 试剂盒	ReadiLink™xtra 试剂盒	Buccutite™ 试剂盒
每个反应标记的抗体量	50ug	50ug	25 µg，50 µg或1 mg
标记原理	使用胺反应性染料靶向游离胺基	使用胺反应性染料靶向游离胺基	使用两个专有的连接器以促进蛋白-蛋白结合
可用标签	iFluor™染料，mFluor™染料，AlexaFluor®等价AF染料，FITC，Cy3，Cy5，Cy7，生物素	iFluor™染料，AlexaFluor®等效AF染料，FITC，Cy3，Cy5，Cy7	PE，APC，串联染料，HRP，AP
标签和抗体之间的键类型	共价	共价	共价
是否与BSA或其他稳定剂兼容	否	是	否
是否需要纯化	否	否	否
共轭所需的时间	1小时	1小时	2小时
操作时间	约10分钟	约10分钟	约15分钟
批次间差异	小	小	小
应用	成像，FC，IF，WB	成像，FC，IF，WB	FC，IF，IHC，WB，ELISA

       
       一、ReadiLink™快速抗体标记试剂盒

 

       ReadiLink™快速抗体标记试剂盒提供了一种快速便捷的方法，可以使用我们的iFluor™染料，mFluor™染料或其他标记物来标记微量的抗体。ReadiLink™试剂盒的独特化学性质使研究人员无需纯化步骤即可轻松标记和回收100％的抗体。由于ReadiLink™共轭物被共价标记，因此可以长期保存，非常适合要求苛刻的应用，包括荧光显微镜，多色成像，多重流式细胞术，一级检测，IHC，FISH，ELISA等。

 

       ReadiLink™快速抗体标记试剂盒的主要功能：

 

       1.标记单克隆抗体，多克隆抗体或其他蛋白质

       2.可用于标记100 µg抗体（两次分别标记50 µg抗体的反应）

       3.100％的抗体回收，不需要的产物的纯化

       4.共轭物可在1小时内投入使用，动手时间最短约为10分钟

       5.可选择iFluor™染料，mFluor™染料，AlexaFluor®equivalent AF染料，FITC，Cy3，Cy5，Cy7，BSA，KLH或生物素

       6.避免使用任何含胺的缓冲液（例如Tris或甘氨酸）

       7.标记前必须去除蛋白稳定剂（例如BSA或明胶），对于需要与BSA兼容的抗体标记，请使用ReadiLink™xtra快速抗体标记试剂盒

 

       方便的设计以取得最大的效果：

 

 

       ReadiLink™快速抗体标记试剂盒利用胺反应性标记来制备共价标记的结合物。这些反应性标记选择性地靶向并结合至目标抗体上的伯胺（例如赖氨酸残基）。要标记您的抗体，只需将您的抗体溶液（浓度约1 mg / mL）与ReadiLink™反应缓冲液混合，将混合物添加到预先配制的标记瓶中，然后孵育30至60分钟。最后，将TQ™染色淬灭缓冲液添加到混合物中并充分混合。这部分很关键，因为它消除了背景干扰且不需要色谱柱纯化步骤。孵育10分钟后，即可使用标记物。

 

       ReadiLink™——Lightning-Link®抗体标记试剂盒的高性能替代品
 

 

标签套件	CD4（SK3）-共轭	染色指数
ReadiLink™ Kit	CD4-iFluor™488共轭物	43
Lightning-Link® Kit	CD4-AlexaFluor®488共轭物	26

       图2.人PBMC细胞的流式细胞仪分析。用ReadiLink™Rapid iFluor488抗体标记试剂盒（货号：1255）或Lightning-Link®Rapid AlexaFluor®488制备的抗人CD4抗体。使用FITC通道中的ACEA NovoCyte流式细胞仪监测荧光信号。

 

 

       表1. ReadiLink™快速抗体标记试剂盒选择指南

 

       

       具有BSA兼容性的ReadiLink™xtra快速抗体标记试剂盒将一抗标记带到了全新的便利水平。ReadiLink™xtra试剂盒将优化的标记方案与经过特殊配制的标记瓶组合在一起，可在常见缓冲液添加剂和蛋白稳定剂的存在下快速，可重复地标记微量的一抗。仅需两个简单步骤，无需进行过柱纯化，即可共价标记适用于任何基于免疫的应用的抗体。

 

       ReadiLink™xtra快速抗体标记试剂盒的主要功能：

 

       1.与BSA和其他蛋白稳定剂兼容

       2.标记单克隆抗体，多克隆抗体或其他蛋白质

       3.标记100 µg抗体（两次分别标记50 µg抗体的反应）

       4.100％的抗体回收，不需要产物纯化步骤

       5.共轭物可在1小时内投入使用，动手时间最短约为10分钟

       6.可选择iFluor™染料，mFluor™染料，AlexaFluor®等效AF染料，FITC，Cy3，Cy5或Cy7

 

       表2. ReadiLink™xtra快速抗体标记试剂盒

 

名称	Ex（nm）	Em（nm）	规格	货号
ReadiLink™xtra Rapid iFluor™350抗体标记试剂盒	344	448	2个标签	1950
ReadiLink™xtra Rapid iFluor™488抗体标记试剂盒	491	516	2个标签	1955
ReadiLink™xtra Rapid AF488抗体标记试剂盒	499	520	2个标签	1978
ReadiLink™xtra Rapid FITC抗体标记试剂盒	491	516	2个标签	1970
ReadiLink™xtra Rapid iFluor™555抗体标记试剂盒	556	569	2个标签	1958
ReadiLink™xtra Rapid AF555抗体标记试剂盒	553	568	2个标签	1980
ReadiLink™xtra Rapid iFluor™594抗体标记试剂盒	587	603	2个标签	1960
ReadiLink™xtra Rapid AF594抗体标记试剂盒	590	618	2个标签	1982
ReadiLink™xtra Rapid iFluor™647抗体标记试剂盒	654	669	2个标签	1963
ReadiLink™xtra Rapid AF647抗体标记试剂盒	650	671	2个标签	1985

 

       三、Buccutite™蛋白到蛋白标记试剂盒

 

       Buccutite™交联技术提供了一种简便的方法，可以用辣根过氧化物酶（HRP），碱性磷酸酶（AP）或藻胆蛋白共价标记蛋白质和抗体。与传统的蛋白质-蛋白质结合技术（例如SMCC化学标记方法）相比，Buccutite™结合显着增强了稳定性，降低了要求。这些试剂盒可在不到两个小时的时间内对微克抗体（每个标记反应低至25 µg）进行最佳标记，而无需纯化，且收率100％。使用Buccutite™标记试剂盒，可以常规制备经共价标记的结合物，这些结合物能够承受典型的免疫测定（例如ELISA，IHC和Western blot）或流式细胞仪应用中通常需要的严格洗涤技术。

 

       Buccutite™快速抗体标记试剂盒的主要功能

 

       1.标记25 µg至1 mg抗体

       2.标签的选择包括HRP，AP，藻红蛋白（PE），别藻蓝蛋白（APC），PerCP，PE串联染料和   APC串联染料

       3.不到2小时的标记时间，无需纯化

       4.100％抗体回收

 

       Lightning-Link®抗体标记试剂盒的高性能替代品

 

标签	CD4（SK3）-共轭	染色指数
Buccutite™ kit	CD4-PE共轭物	55
Lightning-Link® kit	CD4-PE共轭物	28

 

       图3. 人PBMC细胞的流式细胞仪分析。用Buccutite™快速PE抗体标记试剂盒（目录号：1310）或Lightning-Link®PE制备的抗人CD4抗体。使用ACEA NovoCyte流式细胞仪在FITC通道中监测荧光信号

 

       表3. Buccutite™快速抗体标记试剂盒

 

名称	Ex（nm）	Em（nm）	规格	货号
Buccutite™快速蛋白质交联试剂盒*经过微尺度优化，可在每个反应中标记100 ug抗体*	--	--	2个标签	1315
Buccutite™过氧化物酶（HRP）抗体偶联试剂盒*针对标记1 mg蛋白进行了优化*	--	--	1 kit	5504
Buccutite™过氧化物酶（HRP）抗体偶联试剂盒*针对标记100 ug蛋白进行了优化*	--	--	1 kit	5503
Buccutite™过氧化物酶（HRP）抗体偶联试剂盒*针对标记25 ug蛋白进行了优化*	--	--	2个标签	5505
Buccutite™快速PE抗体标记试剂盒*针对每次反应可标记100 ug抗体的微尺度优化*	565	575	2个标签	1310
Buccutite™快速PE抗体标记试剂盒*经过微尺度优化，可标记每个反应25 ug抗体*	565	575	2个标签	1312
Buccutite™快速PE-Texas Red Tandem抗体标记试剂盒*针对每次反应可标记100 ug抗体的微量优化*	565	600	2个标签	1318
Buccutite™快速PE-Texas Red Tandem抗体标记试剂盒*针对每次反应标记25 ug抗体的微尺度优化*	565	600	2个标签	1343
Buccutite™快速PE-Cy5串联抗体标记试剂盒*针对每次反应可标记100 ug抗体的微量优化*	565	674	2个标签	1322
Buccutite™快速PE-Cy5串联抗体标记试剂盒*优化用于每次反应标记25 ug抗体的微量分析仪*	565	674	2个标签	1340

 

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