塑料切片类骨质（osteoid）戈德纳-马森（GOLDNER-MASSON）染色试剂盒使用说明书

塑料切片类骨质（osteoid）戈德纳-马森（GOLDNER-MASSON）染色试剂盒
 
主要用途
 
塑料切片类骨质（osteoid）戈德纳-马森（GOLDNER-MASSON）染色试剂是一种旨在使用三色染料（trichrome），分析和区分存档中的塑料包埋组织切片中的类骨质胶原纤维的权威而经典的技术方法。该技术经过精心改良传统方法、成功实验证明的。主要适用于环氧树脂类、聚甲基丙烯酸甲酯（methacrylate）、邻苯二甲酸乙二醇（BMA）等包埋的骨组织切片类骨质的鉴别分析。产品即到即用，操作简捷，性能稳定，显色清晰。
 
技术背景
 
类骨质（osteoid）是骨基质中未矿物化（unmineralized）的有机部分，一旦矿物化，将产生新生骨组织。90%的类骨质由I型胶原纤维组成。基于戈德纳-马森（GOLDNER-MASSON）三色系统的方法，提供了鲜明的对比，即呈现绿色的矿物化骨质成分和呈现红色的未矿物化的致密的胶原纤维（类骨质）。 
 
产品内容
 
清理液（Reagent A）  200毫升
韦格液A（Reagent B）    5毫升
韦格液B（Reagent C）    5毫升
酸性液（Reagent D）   30毫升
染色液A（Reagent E）   10毫升
修正液（Reagent F）   50毫升
染色液B（Reagent G）        10毫升
染色液C（Reagent H）   10毫升
产品说明书    1份
 
保存方式
 
保存在4℃冰箱里，避免光照；试剂具有腐蚀性，注意安全；有效保证3月
 
用户自备
 
小型玻璃染色缸：用于组织或切片处理的容器
控温热板上（干式恒温仪或加热搅拌仪等）或60瓦白枳灯：用于样品反应孵育
中性树脂：用于切片封片
光学显微镜：用于切片染色后观察分析
 
 
 
实验步骤
 
样本染色开始前，将试剂盒里的试剂置于室温下预热，并避光。然后分别移取100微升韦格液A（Reagent B）和韦格液B（Reagent C）到1.5毫升离心管里，充分混匀后，标记为韦格工作液，即刻使用。
 

• 准备好1至2微米厚的塑料包埋的切片
• 小心加上200微升清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面
• 置于60℃控温热板上（干式恒温仪或加热搅拌仪等）或60瓦白枳灯下孵育，直至液体干化
• 小心加入200微升韦格工作液在切片上，铺满整个切片样品表面
• 置于60℃控温热板上（干式恒温仪或加热搅拌仪等）或60瓦白枳灯下孵育2分钟（注意：避免液体干化）
• 小心移去韦格工作液
• 室温下，小心将切片置入50毫升清理液（Reagent A）中孵育2分钟
• 小心移去切片上的清理液（Reagent A）
• 小心加入200微升酸性液（Reagent D）在切片上，铺满整个切片样品表面
• 置于60℃控温热板上（干式恒温仪或加热搅拌仪等）或60瓦白枳灯下孵育30秒（注意：避免液体干化）
• 小心移去酸性液（Reagent D）
• 室温下，小心将切片置入50毫升清理液（Reagent A）中孵育2分钟
• 小心加入200微升清理液（Reagent A）在切片上，铺满整个切片样品表面
• 小心移去切片上的清理液（Reagent A）
• 小心加入200微升染色液A（Reagent E）在切片上，铺满整个切片样品表面
• 置于60℃控温热板上（干式恒温仪或加热搅拌仪等）或60瓦白枳灯下孵育2分钟（注意：避免液体干化）
• 小心移去切片上的染色液A（Reagent E）
• 小心加上200微升 修正液（Reagent F）在切片上，铺满整个切片样品表面
• 置于60℃控温热板上（干式恒温仪或加热搅拌仪等）或60瓦白枳灯下孵育2分钟（注意：避免液体干化）
• 小心移去切片上的修正液（Reagent F）
• 小心加上200微升 染色液B（Reagent G）在切片上，铺满整个切片样品表面
• 置于60℃控温热板上（干式恒温仪或加热搅拌仪等）或60瓦白枳灯下孵育2分钟（注意：避免液体干化）
• 小心移去切片上的染色液B（Reagent G）
• 小心加上200微升 修正液（Reagent F）在切片上，铺满整个切片样品表面
• 置于60℃控温热板上（干式恒温仪或加热搅拌仪等）或60瓦白枳灯下孵育2分钟（注意：避免液体干化）
• 小心移去切片上的修正液（Reagent F）
• 小心加上200微升 染色液C（Reagent H）在切片上，铺满整个切片样品表面
• 置于60℃控温热板上（干式恒温仪或加热搅拌仪等）或60瓦白枳灯下孵育2分钟（注意：避免液体干化）
• 小心移去切片上的染色液C（Reagent H）
• 小心加上200微升 修正液（Reagent F）在切片上，铺满整个切片样品表面
• 置于60℃控温热板上（干式恒温仪或加热搅拌仪等）或60瓦白枳灯下孵育2分钟（注意：避免液体干化）
• 小心移去切片上的修正液（Reagent F）
• 放上盖玻片或封片（中性树脂）
• 即刻在一般光学显微镜下观察：

细胞核――呈现蓝灰色
类骨质――呈现橘红色
矿物化骨组织――呈现绿色
软骨组织——呈现紫色
 
注意事项
 
本产品为50次操作

• 操作时，须戴手套
• 试剂具有腐蚀性，注意操作安全 
• 试剂溶液在切片表面时，避免有气泡存在，同时确保铺满切片表面
• 整个操作，在避光状态下进行
• 孵育时间可以根据样品的不同、染色深浅的不同而延长或缩短
• 染色完成后，即刻进行光学显微镜观察 
• 样品染色后保存，避免光照
• 本公司提供系列特定组织染色试剂产品

 
质量标准
 

• 本产品经鉴定性能稳定
• 本产品经鉴定显色清晰