Hieff Mut™ Multi Site-Directed Mutagenesis Kit多点突变试剂盒说明书
Hieff MutTM Multi Site-Directed Mutagenesis Kit是基于Hieff CloneTM快速克隆技术的定点突变系统。使用本试剂盒，可一次性向目标质粒上三至五个不连续位点（相距超过50bp）同时引入定点突变。该试剂盒由两个模块组成：HieffTM II Pfu DNA Polymerase扩增模块和Hieff CloneTM快速克隆模块。HieffTM II Pfu DNA Polymerase超高的保真度显著降低了扩增过程中引入新突变的可能性，其卓越的长片段扩增能力，广泛适用于长度小于20 kb的任何质粒扩增。Hieff CloneTM快速克隆系统利用高效的同源重组反应替代传统的退火成环反应。因此使用Hieff MutTM Multi Site-Directed Mutagenesis Kit进行DNA定点突变时，引物设计更加灵活，且扩增反应以指数方式进行，极大减少了模板使用量，有利于原始甲基化模板的彻底降解。
Hieff MutTM Multi Site-Directed Mutagenesis Kit中的重组酶Exnase MultiS经过优化，专门针对多碱基进行定点突变。此外，如扩增产物特异，其DpnI消化产物可不进行DNA纯化而直接用于重组反应。高度优化的反应缓冲液、快捷的操作流程以及极高的成功率，使得Hieff MutTM Multi Site-Directed Mutagenesis Kit成为DNA多点突变首选试剂盒。
应用范围
DNA定点突变
【注】：如使用本品对质粒进行定点突变，请使用甲基化酶无缺陷的宿主菌 (例如Top10、DH5α、JM109)扩增原始质粒！
产品组成
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编号 |
组分 |
产品编号/规格 |
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11004ES10 （10 T） |
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11004-A |
2×HieffTM II PCR buffer |
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11004-B |
dNTP Mix (10 mM each) |
50 μl |
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11004-C |
HieffTM II Pfu DNA Polymerase (1 U/μl) |
50 μl |
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11004-D |
Dpn I (10 U/μl) |
50 μl |
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11004-E |
2× Hieff Clone MultiS Enzyme Premix |
100 μl |
运输与保存方法
冰袋（wet ice）运输。产品-20 ºC保存。有效期1年。
不连续多碱基（相距超过50bp）定点突变实验流程（以不连续三碱基为例）
