膳食纤维的测定及RINTDF法的优势
浏览次数:360 发布日期:2025-1-9
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当前用于测量膳食纤维的分析方法
A. 总膳食纤维方法
AOAC 方法 |
测量成分 |
货号 |
2022.01 |
HMWDF和SDFS IDF、SDFP及SDFS |
K-RINTDF |
2017.16 |
HMWDF与SDFS IDF、SDFP和SDFS |
K-RINTDF |
2009.01 |
所有食物中的HMWDF和SDFS |
K-INTDF |
2011.25 |
所有食物中的IDF、SDFP和SDFS |
K-INTDF |
985.29 |
HMWDF |
K-TDFR |
991.43 |
IDF和SDFP分别 |
K-TDFR |
B. 个体膳食纤维成分方法
AOAC 方法 |
测量成分 |
货号 |
995.16 |
谷物、饲料和食品中的(1-3)(1-4)-β-葡聚糖 |
K-BGLU |
997.08 |
果聚糖和低聚果糖(FOS) |
K-FRUC |
999.03 |
果聚糖和低聚果糖(FOS) |
K-FRUC |
2000.11 |
聚葡萄糖 |
|
2001.22 |
反式低聚半乳糖(GOS) |
|
2002.02 |
抗性淀粉(RS2 和 RS3) |
K-RSTAR |
C. 补充膳食纤维方法 - 较少使用
AOAC 方法 |
测量成分 |
货号 |
991.42 |
食品中的IDF |
K-TDFR |
993.19 |
食品中的SDFP |
K-TDFR |
993.21 |
样本中纤维含量大于10%且淀粉含量小于2%的总高分子量溶解性固体(HMWDF) |
|
994.13 |
HMWDF;提供糖组成和Klason木质素 |
|
2001.03 |
不含抗性淀粉的食物中的HMWDF和SDFS |
|
RINTDF方法(AOAC 2017.16和AOAC 2022.01)相较于综合TDF方法(AOAC 2009.01)的优势
为了克服集成TDF方法报告的所有局限性,调整后创建了RINTDF方法。RINTDF在2016年接受了实验室间评估,并在2018年被接受为AOAC方法2017.16,在2022年被接受为AOAC方法2022.01。
较短的孵育时间:在整合的总膳食纤维(TDF)方法中,与胰α-淀粉酶(PAA)和淀粉葡萄糖苷酶(AMG)的孵育时间为16小时,与已发表的测量抗性淀粉(RS)的方法一致。然而,食物在小肠中的停留时间更可能是约4小时,这是在快速整合总膳食纤维(RINTDF)中使用的时间。为了获得与AOAC方法2009.01在16小时内对一系列对照淀粉/抗性淀粉的水解程度相同,RINTDF方法中PAA和AMG的水平需要大幅增加(PAA从2 KU/检测增加到5 KU/检测,AMG从0.14 KU/检测增加到1.7 KU/检测)。
避免RMD伪影:已有报告在使用整合TDF方法水解某些淀粉时会产生少量的抗性麦芽糊精。这些寡糖在分析方法中对进一步水解具有抗性,但容易被小肠粘膜的α-葡萄糖苷酶复合体水解——因此它们是由分析方法产生的伪影,不应包括在膳食纤维(DF)中。在RINTDF采用的修订孵育条件下,水解淀粉时不会形成有问题的抗性麦芽糊精。
提高RS4的准确性:整合TDF方法的结果显示对磷酸交联淀粉(Resistance Starch 4,RS4)有些低估。虽然使用RINTDF获得的结果与使用整合TDF方法获得的结果非常相似,但对于某些磷酸交联淀粉样品(如Fibersym®)和天然高直链玉米淀粉(例如Hylon VII®),获得了更高(更具生理相关性)的值。
提高FOS的准确性:使用整合TDF方法时,当使用所选的HPLC系统(Waters Sugar-Pak®柱)时,低聚果糖(FOS)也被低估,因为果糖三糖与二糖共洗脱,因此无法测量。为了实现果糖三糖(在FOS中)与二糖的完全分离,改用Tosoh Biosciences LLC的TSKgel G2500PWxL®凝胶渗透柱进行HPLC(如Matsutani Chemical Company推荐的),而不是使用Waters Corporation的Sugar-Pak®柱。使用甘油作为内标物代替山梨醇,因为在TSKgel G2500PWxL®柱上,山梨醇与葡萄糖共洗脱。这导致需要从酶制剂中排除甘油,这已在快速整合总膳食纤维检测试剂盒(K-RINTDF)中实现。
更安全的配方:K-INTDF在孵育缓冲液中使用了叠氮钠以防止16小时孵育期间的微生物污染。鉴于叠氮钠具有显著的毒性,这是不可取的。由于RINTDF使用的孵育时间较短,孵育溶液的微生物感染不是问题,这意味着可以从孵育缓冲液中排除叠氮钠。