小鼠小胶质细胞(BV2)培养要点及异常解决方案

① BV2是一种半贴壁半悬浮细胞，它的形态并不规则，存在圆形和梭形两种。悬浮细胞为圆形，贴壁细胞既有圆形也有梭形。由于圆形细胞折光率高，它的边缘看起来是发亮的；梭形细胞则向两端伸出黑色突起。

① BV2细胞冻存复苏细胞贴壁性差，基本处于悬浮细胞状态，细胞培养48小时后收集悬浮细胞和贴壁细胞，再次分瓶传代，细胞会呈现多边形贴壁细胞和悬浮细胞两种形态。

② BV2细胞正常细胞形态为半悬半贴，传代时收集悬浮细胞在和通过胰酶消化后的贴壁细胞合并一起分瓶传代培养。

解决方案：给细胞换上新鲜配制的培养基，并使用透气瓶。

异常形态2：细胞形态变为阿米巴样

解析：小胶质细胞是一种可塑性极高的细胞，可通过特定因素激活，从而发挥其免疫功能。从静息态变为激活态的过程中，小胶质细胞形态也随之发生改变。

实验中常用细菌脂多糖（LPS）和干扰素-γ（IFNγ），分别模拟细菌和病毒感染，来刺激小胶质细胞激活。受到刺激的小胶质细胞突起缩短变厚，胞体增大，呈现阿米巴样，如果细胞没有受到任何刺激，就已经呈现阿米巴样，那么细胞有可能发生了自分化。

其原因可以从以下几点考虑：

① 存在潜在微生物污染，刺激细胞自分化。

解决方案：通过去掉培养基中的抗生素确定污染类型，并排查污染源头。

② 使用的胎牛血清内毒素高，内毒素刺激细胞自分化。

解决方案：尝试使用其他胎牛血清品牌，或许能得到改善。

异常形态3：全都是分枝状细胞，圆形细胞少

解析：这种形态往往伴随着细胞生长慢或生长停滞的情况。由于圆形细胞增殖速度较快，在圆形细胞缺失的状况下，整体增殖速度就会减慢。