BSA杂质残留替代方案植物源重组人血清白蛋白的优势和应用

在体外诊断（In Vitro Diagnosis，IVD）行业中，BSA（Bovine serum albumin）牛血清白蛋白一直是广泛使用的原材料之一。在各大诊断方法，比如生化、化学发光、质谱等检测方法中发挥重要的作用。但BSA主要是通过牛血浆提取，血清中残留的IgG、蛋白酶、激素、脂肪酸等物质，即使经过相关提纯工艺，仍然会有微量的残留，在一些血液样本，尤其是微量样本检测时，可能会对结果产生干扰，成为了IVD检测的一大痛点。
 
禾优^® OsrHSA，专为IVD检测而生，是一种来源于水稻胚乳细胞的重组人血清白蛋白OsrHSA，由于植物源的生产方式，同时经过严格的提取和纯化后，不含有上述干扰物质，经内部自测和客户反馈，禾优^®OsrHSA可以胜任BSA在IVD行业的相关应用，如保护剂，封闭剂，缓冲液，血浆基质标准品配制等。

禾优^®OsrHSA，是武汉禾元生物科技股份有限公司自主研发、生产的一款植物源重组人血清白蛋白，相比BSA，它是利用生物工程技术重组表达，不源自动物血清提取，具有纯度高，批间差高度一致性等特点，在中国对HSA需求量日益增大的今天，禾优^®OsrHSA无疑是IVD行业的澎湃动力！   
另外，与传统的人血清白蛋白提取不同，禾优^®OsrHSA由基因工程水稻胚乳细胞表达后收集纯化而来，整个过程从根源上解决了血液源成分的残留，提高了产品整体纯度，同时，规模化的种植—采收—纯化生产工艺流程（图1）使得禾优^®OsrHSA具有高度一致的批间重复性，克服了不同批次需多次测试的弊端，同时也规避了微生物重组蛋白发酵液批间不稳定，杂质多的问题。更好的匹配规模化生产使用。

 

1. 使用场景：作为蛋白定量的标准品

HSA同BSA一样，可广泛应用于蛋白质的定量检测，特别是临床血液、体液，临床化学等领域有较多应用。禾优^®   OsrHSA参考商业化的BSA标准品梯度稀释方法稀释后，采用商业化的Bradford（Thermo Fisher）和BCA（Thermo Fisher）检测试剂盒进行标准曲线绘制，结果如图2和图3所示，禾优^®OsrHSA同BSA一样，拟合出的标准曲线线性R²均大于0.99，经准确标定后可在体外诊断领域中作为蛋白质定量的标准品。

2. 使用场景：作为酶、酶标抗体、抗原、细胞因子等的稳定剂

体外诊断检测试剂，如酶、酶标记的抗体、标准抗原等生物活性物质，在存储过程中会受到温度、pH、离子浓度、光照、酶、湿度等因素的影响，严重影响到试剂的稳定性。白蛋白作为血浆中含量最丰富的蛋白，心形的蛋白结构中，有17对二硫键，1个游离半胱氨酸，能够结合多种物质，是血浆中非常重要的物质转运载体，同时具有亲水疏水作用力，作为保护剂，加强与蛋白质的疏水作用，抵抗热变性，稳定蛋白结构。

测试例1：OsrHSA与牛血清白蛋白对酶标抗体的保护对比
测试结果：

结论：禾优^®OsrHSA作为稳定剂，在37℃下对酶标抗体的保护效果明显优于牛血清（图4），且在37℃测试条件下酶促反应的信号值相对于4℃相对变化率在10%以内，稳定性较好（图5）。

测试例2：禾优^®OsrHSA与BSA对肌酸激酶的保护效果
测试结果：

结论：放置不同时间后，加入禾优^®OsrHSA作为稳定剂，不同温度下肌酸激酶的T/C（Test值/Control值的比值）信号比值均高于BSA，表明其稳定性较好（图6），且保护效果不随肌酸激酶的浓度发生变化。

测试例3：禾优^®OsrHSA与BSA对不同PCT（降钙素原）磁珠的保护效果对比
 

结论：加入1% 禾优^®OsrHSA作为稳定剂，37℃放置相对于4℃放置的信号衰减值明显优于BSA（图7）。

测试例4：禾优^®OsrHSA与BSA对OsrhbFGF（重组人碱性成纤维细胞生长因子）的保护效果对比实验
测试结果：

结论：25℃放置不同天数，禾优^®OsrHSA对OsrhbFGF活性保护效果均好于BSA（图8）。
 

3. 使用场景：作为酶、抗原、细胞因子等的稀释剂和免疫检测实验中的封闭剂

在临床血液、体液，临床化学等领域中，常用免疫诊断技术对目标分子进行定性或定量检测。其中免疫层析，ELISA，化学发光，流式等检测技术，抗原或抗体等从高浓度稀释至低浓度过程中，需要用惰性蛋白模拟生理环境保证其活性不受损失，分子构象能够维持长时间的稳定。抗原或抗体吸附在载体上后，需要用到惰性蛋白封闭未结合位点，减少非特异性吸附，减少交叉反应，提高检测方法的灵敏度。
测试例1：禾优^®OsrHSA与BSA对人纤维连接蛋白ELISA检测的封闭和稀释效果对比
测试结果

结论：禾优^®OsrHSA可获得与BSA相似的封闭效果，且0.5% OsrHSA即可获得与1% BSA的封闭和稀释效果（图9）。
测试例2:禾优^®OsrHSA对不同处理的磁珠封闭实验
测试结果：

表1 重组人白蛋白对不同磁珠的封闭效果

结论：禾优^®OsrHSA对不同处理的磁珠进行封闭后，重复测定结果显示其RSD（相对标准偏差）值均小于10%，封闭效果较好（表1）。
测试例3：禾优^®OsrHSA与BSA对吖啶反应试剂的稀释稳定对比
测试结果：

结论：加入禾优^®OsrHSA的吖啶稀释液稳定性较好（表2）。

结论：经检测，禾优^®OsrHSA不含有类固醇等物质（表3），禾优^®OsrHSA作为血清基质对照干扰小，可保证准确性和特异性。

结语
禾优^®OsrHSA作为禾元生物的拳头产品，剑指IVD原辅料市场，经过全方位多次测试，证明重组植物源人血清白蛋白禾优^®OsrHSA因其纯度高，无人源动物源物质，单批次产量大，批间差小的特点，其作为封闭剂、保护剂、稳定剂和各类试剂盒的白蛋白标准品、血清基质时完全拥有常见BSA或牛血清相同或更优的功能，产品也获得了多家客户的积极评价和续订，拥有广阔的市场应用前景。