DNA甲基化研究的三大前期探索性实验思路介绍
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近些年以来，DNA甲基化研究一直是顶级期刊、基金资助、临床研究、药物研发上市的多重热点，其研究方向涵盖疾病发生发展、疾病标志物研究、环境因素暴露与响应、发育和分化等多维度。
研究人员为DNA甲基化课题申请作准备以及为降低DNA甲基化实验风险，通常会进行DNA甲基化研究的前期探索性实验，主要包括：
一、检测DNA甲基化酶和去甲基化酶的表达
方法包括：
e.g. 高脂饮食组和肥胖人群中均观察到DNMT的RNA和蛋白质表达上调
二、检测整体DNA甲基化水平变化
方法包括：
² 5mC甲基化免疫荧光染色（定性）
² DNA斑点杂交（定性）
² 比色法（定量）
² 质谱法（定量）
三、其他前期实验
在没有条件开展甲基化相关前期实验的情况下，也可以开展其他预实验。包括：
² 关键表型指标测定
² 转录组（成本低廉）
在进行前期探索性实验后，DNA甲基化的研究思路与项目设计还包括：技术选择、数据挖掘、下游验证。
近些年以来，DNA甲基化研究一直是顶级期刊、基金资助、临床研究、药物研发上市的多重热点，其研究方向涵盖疾病发生发展、疾病标志物研究、环境因素暴露与响应、发育和分化等多维度。
研究人员为DNA甲基化课题申请作准备以及为降低DNA甲基化实验风险，通常会进行DNA甲基化研究的前期探索性实验，主要包括：
- 检测DNA甲基化酶和去甲基化酶的表达
- 检测整体DNA甲基化水平变化
- 其他前期实验
一、检测DNA甲基化酶和去甲基化酶的表达
方法包括：
- RT-qPCR检测mRNA表达
- Western blot检测蛋白质翻译
e.g. 高脂饮食组和肥胖人群中均观察到DNMT的RNA和蛋白质表达上调
二、检测整体DNA甲基化水平变化
方法包括：
² 5mC甲基化免疫荧光染色（定性）
² DNA斑点杂交（定性）
² 比色法（定量）
² 质谱法（定量）
斑点杂交（Dot blot）
免疫荧光显微观察
比色法/质谱法
三、其他前期实验
在没有条件开展甲基化相关前期实验的情况下，也可以开展其他预实验。包括：
² 关键表型指标测定
² 转录组（成本低廉）
在进行前期探索性实验后，DNA甲基化的研究思路与项目设计还包括：技术选择、数据挖掘、下游验证。
