CD14分子与脂多糖的结合域介绍及作为脂多糖受体的功能简介

Stelter等在N端的152氨基酸区域内用丙氨酸取代而获得一系列的CD14突变体，23种突变体蛋白质中有21种能稳定地表达在转染的CHO细胞表面，其中20种在血浆中对LBP以依赖性的方式结合脂多糖，只有一种突变体（Ala39-Ala41，Ala43，Ala44）CD14不能与脂多糖或大肠杆菌发生特异性的相互作用，也不能引发由脂多糖启动的NF-eB的核移位，且这种突变体的CD14不与CD14单克隆抗体My4发生反应。抗CD14单克隆抗体My4具有广泛的种属间交叉反应性，与人、牛、猪、兔及豚鼠的单核细胞的CD14均能反应，说明My4只能够识别CD14中非常保守的表位。

上述结果显示，N端39~44残基是人类CD14与脂多糖结合位点的最基本部分。Shapiro等在CD14分子的N端合成有5个氨基酸相互重叠，长度为15个氨基酸的多肽，其中包括含上述区域氨基酸的15肽能够抑制脂多糖与sCD14的结合。

CD14作为脂多糖受体的功能
CD14分子作为脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）受体的依据有：①脂多糖能与mCD14和sCD14分子相结合。②CD14单克隆抗体能够抑制脂多糖刺激吞噬细胞的反应能力。③对脂多糖低反应或不反应的细胞转染CD14 cDNA后对内毒素反应的敏感性显著增加。④CD14分子表达缺陷的小鼠对内毒素的反应显著下降。所以，CD14被认为是内毒素重要的受体。⑤用不同颜料显示剂分别标记脂多糖和CD14发现，在发生信号转导的过程中，有颜色重叠现象。

研究者已阐明了CD14与内毒素结合在体内的作用，他们发现使用CD14抗体能够阻止CD14与脂多糖的结合并能显著减弱内毒素的激活效应。CD14能够有效结合脂多糖，有LBP存在时，其结合效应能增大到100~1000倍。LBP为相对分子质量60000的糖蛋白，主要由肝脏和肺合成，与BPI和其他脂质转移蛋白质的氨基酸序列具有显著相似性。一般情况下LBP在血浆中的浓度为2~20g/L，在急性期反应时可升到100~200g/L。LBP能与脂多糖聚集体相结合，一个LBP分子能够运输几百个脂多糖单体，并具有催化特性。
 

1990年，Wright 等首先认识了CD14在识别脂多糖中的作用。他们发现，以外周血中小剂量内毒素刺激时，巨噬细胞分泌TNF-α的效应对CD14具有依赖性，CD14单克隆抗体具有抑制TNF-α产生的能力。随后，其他学者证实CD14在巨噬细胞产生TNF-α中具有重要作用。脂多糖诱导IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α等表达的效应可用CD14单克隆抗体进行部分抑制，这进一步证明CD14在脂多糖介导的细胞激活中的作用。