解析血清使用操作中常见问题
浏览次数:167 发布日期:2022-6-21
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解析血清使用操作中出现的常见问题,供您实验参考。
一、培养基中添加了血清和抗生素后,可长期保存吗?
答:一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时,您应该在两到三周内使用它。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。
二、如何选用特殊细胞系培养基?
答:培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞,很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之,shou选MEM做粘附细胞培养、RPMI-1640做悬浮细胞培养是一个好的开始。
三、何时须更换培养基?
答:视细胞生长密度而定, 或遵照细胞株基本数据上之更换时间,按时更换培养基即可。
四、可否使用与原先培养条件不同之培养基?
答:不能。每一细胞株均有其特定使用且已适应之细胞培养基, 若骤然使用和原先提供之培养条件不同之培养基, 细胞大都无法立即适应, 造成细胞无法存活。
五、可否使用与原先培养条件不同之血清种类?
答:不能。血清是细胞培养上一个极为重要的营养来源,所以血清的种类和品质对于细胞的生长会产生hen大的影响。来自不同物种的血清, 在一些物质或分子的量或内容物上都有所不同,血清使用错误常会造成细胞无法存活。
六、为何培养基保存于4℃冰箱中,颜色会偏暗红色,且pH值会越来越偏碱性?
培养基保存于4℃冰箱中,培养基内之CO2会逐渐溢出,造成培养基越来越偏碱性。而培养基中之酸碱指示剂(通常为phenol red)的颜色也会随碱性增加而更偏暗红。培养基偏碱之结果,将造成细胞生长停滞或死亡。若培养基偏碱时,可以通入无菌过滤之CO2,以调整pH值。