文献解读 丨基于PCR测序技术的HBV感染者耐药突变临床分析

目前对于慢性乙型肝炎（CHB）的治疗还不能像DAA治疗丙肝那样完全治愈，只能最大限度地长期抑制病毒的增长。

而由于HBV感染的复杂性和药物疗效的局限性，需要我们治疗慢性乙肝的时候实行精准治疗。

那么如何精准治疗？首先需要精准检测。

 

本期给大家分享的是来自天津市肝病医学研究所的一篇名为《基于PCR测序技术的HBV感染者耐药突变临床分析》的文章。

作者利用PCR测序技术成功分析了HBV感染者核苷(酸)类似物（NAs）耐药突变情况以及HBV基因型的分布，为临床合理用药提供了参考。

本篇文章涉及到了耐药检测技术、常用核苷（酸）类似物的耐药率、TDF耐药突变等多个临床治疗CHB所遇到的问题，所以今天就从以下5个方面来给大家做个简单的解读。

 

1.HBV感染者耐药检出率高达37.5%，非精准用药会增加耐药率的发生

本篇文章中317例HBV感染者，119例发生了耐药突变，耐药率高达37.5％。其中单用恩替卡韦的耐药率为16.3%明显高于临床试验数据，值得重点关注。

此外，在几种治疗方式中联合或序贯治疗的患者124例人数最多，其中65例出现了耐药突变，耐药率也最高。

这说明现在很多患者接受的是非精准用药，同时使用多种药物或是多次更换药物的治疗方式会加速耐药的发生。

2.不同核苷（酸）类似物具有不同的突变位点及耐药途径

本研究中拉米夫定、恩替卡韦、阿德福韦、替比夫定都出现了多个耐药突变位点，rtM204I/V是主要的耐药突变类型。

其中2例患者出现TDF耐药突变，rtA194T是TDF主要的耐药突变类型，其他研究中鲜有报道。

14例患者出现TDF不敏感位点突变，多个指南明确指出rtN236T是TDF的不敏感位点。

TDF和ETV属于高耐药屏障药物，若患者存在拉米夫定耐药或预存耐药将会大大提高恩替卡韦的耐药率。

本研究中发生的2例TDF耐药突变，患者也都有LAM使用史。

TDF作为核苷(酸)类药物，长期治疗可能发生病毒耐药变异，此点为核苷(酸)类药物治疗的缺陷。

3.C基因型HBV易发生多重耐药

本研究检测到的发生耐药突变的119例患者中， 8例B型患者有2例(25.0％)发生了多重耐药突变；110例C型患者中有45例(40.9％)发生了多重耐药突变，其中采用单一NAs治疗的共计9例，采用多药联合或序贯治疗的共计36例；D型没有发生多重耐药突变的病例。

在一定程度上，提示C基因型HBV更易发生多重耐药，这为C型HBV感染病例的难治性提供了新的证据。

4.合理及时进行耐药检测，精准用药可降低耐药的发生

随着核苷类似物的普遍应用，耐药性已经成为一个重要问题。预防胜于治疗是医学的基本原则，合理应用NAs治疗慢性HBV是防止耐药性发生最有效的措施。

目前为减少疗效不佳和耐药突变的发生，提倡个性化治疗。

本研究分析了317例HBV感染者接受NAs治疗过程中出现耐药突变的情况以及HBV基因型，根据病人的个体情况制定了相应的治疗方案，保证了最佳治疗效果。

5.PCR测序技术（Sanger测序）是乙肝耐药和分型检测的最佳选择

本篇文章利用Sanger测序技术成功检测了308例HBV感染者NAs耐药突变情况，为后续分析提供了可能。

Sanger测序法是分子诊断领域的金标准，具有多个检测优势：

1.结果准确可靠，假阳性低

2.可连续检测一段核苷酸序列，覆盖范围广，结果直观可视

3.目标明确，可以进行个性化位点检测

Sanger测序能够一次性进行常见型别分型和耐药位点检测，结果精准，性价比高

2017版卫计委在《感染性疾病相关个体化医学分子检测技术指南》中明确指出：DNA序列分析是检测基因突变最直接可信的方法，是所有其他检测变异技术的基础。

通过本篇文章可以看出抗病毒治疗是一个漫长的过程，精准检测在用药过程中必不可少。通过检测严密监测耐药的发生，才能做到早检测、早治疗。

最终达到抗病毒治疗的四个目标：疗效最大化、耐药最小化、费用尽可能最少化和疗程个体化。

乙肝精准用药三部曲

Ps：以上内容仅代表本篇解读文章的观点，并不能表示本公众号的全部意见。

解读文献：

蒋贝, 戴晨阳, 李秀梅, et al. 基于PCR测序技术的HBV感染者耐药突变临床分析[J]. 中华肝脏病杂志,2016, 24(1):36

文章通讯作者

陆伟，男，主任医师，上海交大特聘教授，中华消化学院教授，华北煤炭医学院教授，院长，天津市医科大学研究生导师，中华医学会消化分会全国委员，天津肝病分会常委，天津影象技术研究会副主任委员，《天津医药》、《实用肝脏病学》等杂志编委，擅长肝炎、肝硬化及并发症、肝癌、胃肠病等的诊治  

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乙肝病毒耐药和分型检测（Sanger测序法）

 

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• 国内唯一获得CFDA的Sanger测序法的乙肝耐药分析检测
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