牛口蹄疫病毒O型抗体检测试剂盒检测原理与方法

 

样品要求：
1. 本试剂仅适用于检测牛血清或血浆。
2. 为取得最佳实验效果，避免使用含叠氮钠、高血脂、长菌以及严重溶血的样品；
3. 短期（3天内）将进行检测的血清样品可存放于2～8℃；如需长期保存，应置于-20℃以下，避免反复冻融。

检测方法：
1. 洗涤液配制：用蒸馏水或去离子水将洗涤液10×(2号液)按1:10稀释（例如，取100mL洗涤液10×，加900mL蒸馏水或去离子水混合），充分混匀即为工作浓度洗涤液。
2. 样品稀释及加样：用样品稀释液（5号液）将待检血清按1:100稀释（如5μL血清＋495μL样品稀释液），在样品孔每孔仅加入已稀释的待检样品100μL；如果采用血清稀释板稀释样品，其使用方法详见说明书背面。
3. 加对照品：阴性、阳性对照品不用稀释，直接加样。 阴性对照2孔，每孔仅加入100μL阴性对照品；阳性对照2孔，每孔仅加入100μL阳性对照品。盖好封板膜，37℃避光
反应30分钟。
4. 洗板：甩去孔内液体，每孔注满工作浓度洗涤液洗涤3次，每次均需停留1分钟；最后一次甩净，拍干。
5. 加酶反应：每孔加酶标结合物（1号液）50μL，盖好封板膜，37℃避光反应30分钟。甩去孔内液体，如上洗板，拍干。
6. 显色反应：按所需用量，临用前取等体积底物液（3号液）和显色液（4号液）充分混匀，每孔加100μL，盖好封板膜，37℃避光反应10分钟。
7. 终止反应： 加终止液（6号液）50μL，用酶标仪双波长（450nm作为主波长，630nm作为参比波长）读取OD值。