NRAMP-1 elisa检测试剂盒免疫检测方法

NRAMP-1 elisa检测试剂盒免疫检测方法：

（一）夹心法：

可分为双抗体夹心法和双抗原夹心法。

双抗体夹心法将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗体；加入待测样本，形成固相抗体-抗原复合物，洗涤后加入标记特异性抗体并孵育，形成固相抗体-抗原-标记抗体复合物，洗涤除去未结合的标记抗体；加入不同的反应物质（如酶促底物、碱性溶液、氧化剂等），得到反应信号。

双抗原夹心法与双抗体夹心法类似，将特异性抗体与固相载体连接，形成固相抗原；加入待测样本，孵育使样本中的抗原与固相抗体充分反应，形成固相抗原-抗体复合物，洗涤除去未结合物质；加入标记特异性抗原并孵育，加入反应物质，判读结果。

（二）间接法：

间接法仅能检测抗体，基本原理是将特异性抗原包被在固相载体上，加入待测样本，形成固相抗原-受测抗体复合物；孵育洗涤后，加入标记抗体。

（三）竞争法：

既检测抗体，也可检测抗原。

基本原理是先将抗小分子抗原的特异性抗体包被在固相载体上，然后同时加入待测样本与标记小分子，待测样本中的小分子与标记小分子竞争与固相抗体相结合，温浴一定时间后洗涤加入不同的反应物质，得到反应信号。

（四）捕获法：

NRAMP-1 elisa检测试剂盒可测定血清中某种特定的免疫球蛋白，目前主要用于IgM抗体的检测。通常包被的固相抗体为针对IgM分子μ链的抗体，加入待测样本后，特异及非特异的IgM抗体都会被固相抗体捕获，之后加入能够与特异性抗体结合的已知抗原，再加入能够与已知抗原相结合的标记抗体。