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ELISpot实验操作流程介绍

浏览次数:6481 发布日期:2014-4-23  来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则责任自负

 

ELISPOT全名为酶联免疫斑点检测,英文:Enzyme-linked Immunospot Assay。它结合了细胞培养技术与酶联免疫吸附技术(即ELISA技术),能够在单细胞水平检测细胞因子的分泌情况。其技术原理,一句话概括就是:用抗体捕获培养中的细胞分泌的细胞因子,并以酶联斑点显色的方式将其表现出来。

将细胞因子特异性单克隆抗体包被于乙醇处理过的PVDF膜板上具体板子处理和包被方法请参考
https://www.mabtech.com/knowledge-center/tutorials-and-guidelines/plate-coating-guide

 

将细胞加入到酶标孔中不同组加不同的刺激剂或者不加刺激剂 具体细胞处理方法请参考
https://www.mabtech.com/knowledge-center/tutorials-and-guidelines/cell-handling

 

细胞分泌的细胞因子与包被抗体结合

 

将多余细胞除去并洗板后将生物素标记的检测抗体加入到酶标孔中

加入连霉亲和素标记的酶偶联物

加入底物
https://www.mabtech.com/knowledge-center/tutorials-and-guidelines/enzymes-substrates/enzyme-conjugates

使用酶联免疫斑点读板仪读取斑点并分析信息来源
https://www.mabtech.com/knowledge-center/assay-principles/elispot-assay-principle/elispot-step-step

 阅读原文:http://www.liankebio.com/TechServiceShow/articleID/2014040021.html

来源:杭州联科生物技术股份有限公司
联系电话:4006721600
E-mail:network@liankebio.com

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