抗体选择指南

 

    抗体亲和层析原理是蛋白 A和蛋白 G对不同来源的IgG的Fc-区具有高度亲和性和特异性。这些蛋白被固定在我们的许多填料上，产生了从腹水、细胞培养上清液和血清中分离IgG和IgG亚类的极好方法。关于抗体亲和纯化的全部产品系列，见下页抗体亲和填料和层析柱选购指南。

 

    蛋白A (Protein A) 来源于金黄色葡萄球菌的一个株系，它含有5个可以和抗体IgG分子的Fc段特异性结合的结构域，可以特异性的和样品中的抗体分子结合，而使其他杂蛋白流穿，具有极高的选择性，通常一步亲和层析就可达到超过95%的纯度。ProteinA sepharoseCL-4B，是将从金黄色葡萄球菌表达纯化出蛋白A通过CNBr的方法偶联在sepharose CL-4B的介质上，可以纯化体液或细胞培养液中的免疫球蛋白。nproteinA sepharose4FF，nprteinA即为天然 (Native ProteinA)，表示其在生产过程中没有引入任何动物来源的组分。rproteinA sepharose4FF，重组的蛋白A (rProtein A)，经基因工程改造后含有一个C末端半胱氨酸，可以单一位点定向偶联于琼脂糖骨架上，有效降低空间位阻，增加了与IgG 的结合能力。同时配基在发酵和纯化过程中没有引用人源的IgG，避免了人源IgG的污染风险。rmpProteinA，多位点附着的技术，保证更低的配体的脱落。一步高度纯化单抗和多抗。

 

    2005年GE推出了新一代的MabSelect ，是第一个使用高流速琼脂糖凝胶 ( High flow Agarose) 作为骨架的新型蛋白A层析介质，专为大规模抗体纯化而设计。相比传统Fast Flow填料，高流速琼脂糖具有高流速高载量，更低的配体脱落，易于清洗与除菌消毒，寿命更长、更经济，适合快速高效的进行抗体生产和放大，已经成为治疗用单抗纯化和放大的标准介质。2011年又推出了新产品MabSelect LX，更高的动态载量60mgMab/ml，更大的降低了成本

 

    蛋白G是G族链球菌的一种细胞表面蛋白，是Ⅲ型Fc-受体，与IgG结合类似于蛋白 A，以非免疫机制结合。我们提供的是其天然蛋白的白蛋白结合区域被基因敲除后在大肠杆菌中表达的重组蛋白形式(HiTrap Protein G HP、Ab SpinTrap、ProteinG Sepharose 4 Fast Flow、GammaBind G Sepharose和GammaBindPlus Sepharose)，重组蛋白 G含有两个Fc结合区。也提供预装有Protein G SepharoseHigh Performance填料的Ab SpinTrap层析柱，它可以通过离心的方式方便地捕获和纯化单克隆和多克隆抗体。

 

    尽管蛋白A和蛋白G亲和填料在许多方面是类似的，但对IgG的特异性却不同。对一般抗体捕获蛋白G亲和填料是一种很好的选择，因为它可以结合广范围的真核类生物表达的IgG，并且可以结合更多的IgG亚型。

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