核酸绝对定量之数字PCR技术的实验流程与应用

数字PCR技术
数字PCR技术是将含有核酸分子的反应体系分成成千上万个纳升级的微滴，其中每个微滴或不含待检核酸靶分子，或者含有一个至数个待检核酸靶分子。经PCR扩增后，对每个微滴进行检测，根据泊松分布原理及阳性微滴的个数与比例即可得出靶分子的起始拷贝数或浓度。
 

数字PCR是一个全新的绝对定量方式，与传统PCR定量PCR相比：其结果的精确度、准确性和灵敏度更佳，结果不依赖Ct值，直接给出靶序列浓度，实现真正意义上的绝对定量。

数字PCR应用

• 定量癌症标志物；
• 区分基因组变异；
• 研究病毒载量；
• NGS结果验证；
• 基因表达分析；
• 基因拷贝数检测；
• ......

平台优势

• 服务周期短：1.5-2h检测时长
• 可多重检测 ：6色荧光通道
• 灵敏度高 ：＞90%液滴有效率、样本有效利用率可达95%
• 精确度高 ：一步法RT-PCR试剂，提高RNA样本检测精确度
• 试剂开放 ：兼容客户试剂体系，增大特殊检测成功率

实验流程

结果示例

样品信息
DNA样品：纯度OD260/280 比值为 1.6-1.8，浓度≥10 ng/μl，体积≥20μl。
RNA样品：纯度OD260/280 比值为 1.8-2.0，浓度≥20 ng/μl，体积≥20μl。需要干冰运输。

应用案例
数字PCR仪在食品和药物检测中的应用（上）

杭州沃森生物技术有限公司应用新一代Sniper DQ-24全自动数字PCR,提供感染性疾病研究、遗传疾病研究、肿瘤生物标志物研究、NGS文库定量、基因表达分析、环境监测和食品安全检测等服务。同时提供免费Demo实验，欢迎参观及预约服务。