探讨细胞培养中血清中有沉淀物的影响
浏览次数:234 发布日期:2022-8-23
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细胞培养中血清中有沉淀物的影响:
1、细胞生长
经验表明沉淀物不会影响细胞培养。
2、过滤
如果血清中出现大量的沉淀物,血清将很难过滤。一般说来,因为在血清生产时最后已经经过100纳米或者40纳米的过滤处理,并且经过了严格的无菌检测,因此海克隆不推荐再过滤用于细胞培养的血清。在实验室中没有必要再过滤处理血清,在大规模的细胞培养中往往将血清直接加到培养基中一起过滤。
3、污染
磷酸钙往往被误认为微生物污染而引起争端。研究者可能会在血清中观察到一些絮状的沉淀,因此就会比较警觉的去做无菌试验,将血清放在培养箱中培养几天,结果可能会观察到更多的絮状沉淀,因此就断定血清被污染了。并且当研究者将血清样品放在倒置显微镜下观察时往往可以看到一些可以运动的小黑点,因此 就更加确认是血清被污染了。于是,研究者就会花费更多的时间和精力来和生产商确认,但最终确定血清没有被污染而只是沉淀。为了避免这些问题的发生,我们建议不要直接将血清放在培养箱中培养观察是否有菌,而是将血清加到琼脂板上进行培养以观察是否有细菌生长。另外,也可以进行革兰氏染色,在油镜下观察,以确认是否有污染。
血清产品使用注意事项(仅供参考):
1、血清解冻采用逐步解冻法(-20℃→2—8℃→25℃或37℃),解冻过程中必须随时轻摇,使血清受热温度均匀。
2、血清凝絮物,血清解冻后会出现少量片状或絮状物析出,这主要是由于血清内不稳定蛋白变性、纤维蛋白析出形成沉淀物,实验证明沉淀物不会影响血清本身质量。
3、热灭活本产品除注明外均未灭活。如果必须灭活,请严格按照56℃30分钟(水浴)处理已解冻血清。
4、常温状态下短期融化并不会影响血清质量。
5、产品有效期,检定合格之日起有效期5年。