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小鼠胎儿表皮角质形成层细胞的培养方法与注意事项

浏览次数:865 发布日期:2022-4-8  来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则责任自负
 细胞简介

  细胞名称:小鼠胎儿表皮角质形成层细胞

  规格:1×10⁶Cells/T25培养瓶

  细胞信息:原代细胞

  培养条件:原代细胞取组织现分

  产品特点:多种细胞现货供应,代次低,状态好,现货。

  储存:接收到冻存细胞时请立即从干冰转入液氮中保存。

  运输:冻存的细胞干冰运输,复苏的细胞冰袋运输。

  用途:研究

  注意事项:仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用(产品信息以出库为准)

  小鼠胎儿表皮角质形成层细胞培养方法

  1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

  2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

  3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时,弃去培养基后加入少量*,细胞变圆脱落后,加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中,再添加10%DMSO后进行冻存。

  对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

  1、弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

  2、加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

  3、按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

  4、将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

  对于悬浮细胞,可参考以下方法:

  一般传代可直接将细胞原液分置其它培养瓶内,加入完全培养基继续培养,如要高浓度可先离心1000rpm,5min后加入完全培养基,轻轻吹匀后,分置其它培养瓶内加入完全培养基继续培养。

  注意事项

  1、收到细胞后,若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染,请立即与我们联系。

  2、收到细胞先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时(视细胞密度而定)稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收细胞时就整体外观拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,随后在显微镜下拍下细胞状态,100*,200*各一张),观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。

  3、由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响,故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明,期间间隔时间不能大于7天。

  4、所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性,必须在二级生物安全台内操作,并请注意防护,所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
来源:智立中特(武汉)生物科技有限公司
联系电话:18907174295
E-mail:1730571639@qq.com

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