对枯草芽孢杆菌介绍使用及规模繁育使用方法
一、枯草芽孢杆菌相关
在水产养殖中，微生态环境起着养殖生物排泄物及残饵的分解、转化、水质因子的调节与稳定等作用。它的正常与否决定着水质的优劣，进而影响养殖生物能否健康成长。我国的水产养殖多以静水为主，池塘老化严重，自净与调节能力较差，这是预防病害的关键。目前，相对于物理和化学方法，应用微生物治理养殖水体已成为新兴的热点。枯草芽孢杆菌分解、转化和适应能力强，对养殖生物和人体无害，因而目前被大量的用于水产养殖中。
⒈枯草芽孢杆菌的特性
枯草芽孢杆菌呈直杆状，单个，无荚膜，能运动，革兰阳性菌（凡是购买自行繁育的菌体不具备这些特征，则有可能非枯草芽孢杆菌，谨慎在水产养殖上使用，其中蜡样芽胞杆菌不适用于虾类养殖[很多产品混淆视听，简单写芽孢杆菌]），是我国农业部正式批准使用的益生菌，具有菌种单一、对抗生素无耐药性及对水产动物无毒性等特点。作为益生菌特性为：（1）耐酸、耐盐、耐高温及耐挤压。（2）在肠道内不增殖，在肠道的上段迅速发展成具有新陈代谢作用的营养型细胞，参与菌群的平衡调节。（3）提高短链脂肪酸含量，降低肠道pH及氨浓度（4）繁殖过程中产酸、酶和多种维生素。
⒉枯草芽孢杆菌的作用机制
枯草芽孢杆菌在水产动物肠道的作用主要表现在以下几方面：（1）能产生抗弧菌和酵母菌的活性物质，对鱼类嗜水气单胞菌、细菌性败血病病菌、大黄鱼致病菌、中华绒螯蟹致病菌及金黄色葡萄球菌有强烈的抑制作用。（2）繁殖过程中分泌大量的蛋白酶脂肪酶和淀粉酶，能补充机体内原酶的不足，提高饲料的降解和吸收速率，促进水产动物消化。（3）大量好氧，形成肠道厌氧环境，有益于乳酸菌等有益菌增殖，完善肠道生物屏障的作用，抵抗病原菌的定植和侵害。（4）枯草芽孢杆菌细胞的主要成分葡聚糖能发挥免疫刺激物的作用，提高鱼类的非特异性免疫功能。
⒊枯草芽孢杆菌的作用方式
⑴作为饲料添加剂
由于枯草芽孢杆菌能耐受高温高压，保持良好的稳定性和生物活性，因此，当前以饲料添加剂在水产养殖中的应用较多。枯草芽孢杆菌的防病能力源于对养殖对象体内微生态环境的改善和机体免疫力的提高。当枯草芽孢杆菌被吞食人肠道后，消耗氧气，造成充满二氧化碳的厌氧环境，从而扶持和促进双歧杆菌、乳酸菌等有益菌的增殖，有益菌能与肠系膜上皮细胞紧密结合，迅速定植，形成微生物膜，构成肠道生物屏障，阻碍病菌的人侵和定植，又通过发酵作用产生大量乳酸、乙酸，降低肠内pH，维持正常的肠蠕动并使致病菌被排出体外。枯草芽孢杆菌细胞的主要成分葡聚糖，能发挥免疫刺激物的作用，提高养殖对象的非特异性免疫功能。机体吞噬细胞的活性也因枯草芽孢杆菌的进人而被激活，吞噬和消化能力大大加强，从而提高机体的免疫力。饲料中添加枯草芽孢杆菌能提高南美白对虾免疫功能和抗氧化能力，从而促进其生长，适宜添加量为0.05%（干粉计）。饲料中添加枯草芽孢杆菌能有效地提高血细胞的吞噬活性，同时能使克氏原螯虾溶菌酶的产量提高。饲料中添加枯草芽孢杆菌后，斑节对虾的酚氧化酶的活性和抗菌活性得到了提高。
⑵作为水质改良剂
在水产养殖中作为水质改良剂的主要是光合细菌。枯草芽孢杆菌能大量消耗水体中的有机质，将其分解为小分子有机酸、氨基酸及氨，改善水质，为单胞藻提供营养，还可使氨浓度降低，净化水质。在水体中使用枯草芽孢杆菌制剂后，对氨氮、亚硝酸盐和硫化物均有大幅度降低。在蟹池和鱼池中分别加入枯草芽孢杆菌作为水质改良剂发现，其对池塘氨氮、亚硝酸盐氮和硫化物有明显的降解作用，最大降解峰值出现在3~4天，有效时间持续超过7天。因此，作为水质改良剂可视水质情况每7天泼洒全池1次，使用后及时开增氧机，以保证达到最好的使用效果。
⒋枯草芽孢杆菌在水产养殖上的应用效果
⑴虾类养殖中的应用
2002年4月海南英州江海养殖厂进行了斑节对虾精养高位养殖池应用实验，施用枯草芽孢杆菌后，由于枯草芽孢杆菌的繁殖和代谢作用，养殖池中的有害物质——亚硝酸盐、硫化氢减少，亚硝酸盐浓度从0.0769μg/L下降到0.0599μg/L，而同期对照池亚硝酸盐浓度则从0.0677μg/L上升到0.079μg/L；硫化氢对照池浓度在0.00515-0.0246mg/L的范围内波动，而处理池硫化氢浓度10天内从0.068mg/L降到0.0109mg/L，并且开始两天内，更是骤降了0.0422mg/L之多。 衡量水质污染状况的化学耗氧量COD值明显降低，10天内COD值从投放前的9.054下降到8.222，而对照的每次测量值都高于处理池，COD值从9.072上升至9.57并且总碱度（ALK）降低，pH值也维持在适宜对虾生长的安全水平。证明枯草芽孢杆菌能够达到净化水质，优化养殖水体环境，保持养殖池微生态平衡的效果。并研究了枯草芽孢杆菌在虾塘中的消长规律，发现枯草芽孢杆菌施人养殖池后，能够很好的适应海水盐度和渗透压、温度等环境并通过自身的繁殖，使菌数逐渐增加，5-8天达到高峰。因此，投放枯草芽孢杆菌的时间间隔以一周左右为宜。
⑵河蟹育苗中的应用
（2001）在江苏江洋特种水产养殖场河蟹育苗阶段进行投放枯草芽孢杆菌试验：选用8m3的水泥育苗池一组，水温19-25℃。每天投喂12次，其中蛋黄、藻粉各3次，轮虫、枝角6次。对照池每天换水2次，换水量每天15%-30%，312小时共换水7倍，并且先后施用了土霉素、痢特灵、高锰酸钾。试验池312小时中投放枯草芽孢杆菌3次，每次3克，正常投饵，不换水，不用药。试验结果：对照池平均氨氮量为0.313mg/L，试验池为0.285mg/L，比对照池降低8.9%，节约用水85.7%
⒌使用枯草芽孢杆菌的注意事项
（1）枯草芽孢杆菌虽然能够净水防病，但它并非能防止所有病害的发生，养殖者应密切关注水体状况，以多种手段综合防治。
（2）枯草芽孢杆菌并非用的越多越好，因为它是一种好氧菌，过量使用会造成水体缺氧，引发养殖水产品因缺氧而死亡，所以需要在水体施入枯草芽孢杆菌后，及时进行增氧，防止出现缺氧现象，造成损失。
（3）使用枯草芽孢杆菌时，经过扩配培养然后再水体泼洒施入更加高效。因为产品中的细胞均以芽孢状态存在，处于休眠状态，不具备代谢能力，如果直接投人会效果缓慢且不显著；经过培养扩配的枯草芽孢杆菌，不但能够有效快速激活孢子，并且迅速增殖菌体，达到原菌数的N倍，投人水体后，代谢旺盛，能在池塘中迅速增殖，分解大量有机质，效果显著。扩配培养不但有效的节约了成本，提高了单袋菌体的使用面积及亩数，而且会迅速作用水体。
（4）枯草芽孢杆菌不要与杀菌剂一同使用。否则枯草芽孢杆菌会被杀死，起不到净水作用。根据水体状况、养殖密度及天气情况，结合增氧设备，既能保证水体得以净化，又能保证养殖对象的正常活动。
二、枯草芽孢杆菌扩培的相关知识点
⒈充氧设备的选择：充氧泵的功率根据培育水体的体积大小而定，可以采用森森鱼缸用的小型增氧泵，如果培养菌液体积为100斤，则可以采用45W功率的充氧泵，如果培养的菌液体积为200斤，则可以采用55W功率的充氧泵，如果在200斤以上，可以根据实际情况进行充氧泵的选择，充气头全部接入，增加出气量及均匀度，充气头请选择气泡石为最佳；
⒉容器的选择：容器可以选择透明或者不透明的都可以，一般容器体积较大的多为白色或者蓝色；容器的体积根据自己每次的水体泼洒施入量进行选择，可以选择100斤或者200斤甚至更大一点的；
⒊培育环境的选择：培育环境干净整洁，没有扬尘，操作过程越干净越整洁，所能够获得的扩配代数就越多【所以，扩配代数同操作是紧密相关的】，不能置于阳光直射的环境下进行培育，切勿选择错误，其他光线环境均可【晚间无需光照】；
⒋培育水源的选择：水源请选择静止曝气24小时的自来水或者干净含杂菌少的地下淡水；推荐曝气过的自来水（某些地区的地下水重金属超标，对于菌体的繁育会产生负面效应）；
⒌温度：菌体的繁育时间跟温度是相关的；温度在30-35度之间需要5-7小时即可，温度越低，需要的繁育时间就越长；如果在冬季需要使用枯草芽孢杆菌，建议做培养液温度的提升和恒温，保证菌体的繁育时间段为最短，需要置备下列物品：电子温控器、鱼缸潜水泵、u型潜水加热管
⒍菌液成熟的标志：枯草芽孢杆菌的代谢物分为胞外蛋白酶及多种酸类；其中胞外蛋白酶对于有机质分解的作用比较强效；菌液的ph值会随着代谢物酸类的增加而降低至5.8-5.2至以下，菌液的投放时间选择在菌液ph为5.8-5.5之间最为适宜，这个ph段活菌含量最多，孢子数量少；菌液表面张力扩大，泡沫丰富；气味为发酵的酸味；镜检可见：菌体活跃，游动能力强，菌体增殖明显，菌体数量丰富，有机质明显减少；
⒎下面我们就以培育100斤的枯草芽孢杆菌实例讲解下：
准备好容器，加入90斤曝气过的自来水，取本店铺的枯草芽孢杆菌或者您比较信赖的枯草芽孢杆菌200克，充分将其溶解于水体中，然后我们取培养基一袋，并加入10斤温水，温度30度左右即可，并将培养基充分的进行溶解，并将其导入到容器中，并将其混合均匀，至此，100斤菌液配置完毕；接入充氧机，并开始记录ph的变化，在菌液ph在5.8-5.5之间时，即可投入水体的泼洒使用，有条件的养殖人员，可以通过镜检观察下菌体的状态；
菌液成熟后，我们留出10斤作为下次培育100斤的原液，剩下的90斤菌液可以投入使用；由于枯草芽孢杆菌的繁育环境为非密闭性，包括充氧泵的充气状态都决定了在培育的过程中容易遭受杂菌的感染，所以，操作过程越严格，环境越干净，那么可以获得的培育代数就越多；保留菌液容器尽量干净，容器盛满并密封保存，置于遮光黑暗环境下，使菌体全程呈休眠状态或者向孢子转变，待下次培育时再开始启用；
⒏自行繁育枯草芽孢杆菌的优势：
菌体增殖，并全部可以呈现活菌状态，施入水体后，可以快速作用于水体；活菌更加具有抗逆性，快速适应本地的水质环境，不但提高了用量，而且减低了成本；比如：我们一袋枯草芽孢杆菌完全扩配可以作用于25-50亩的水面，如果我们只单独用药品进行投放，则需要投放16-25袋药品，如果我们自行扩配，则只需要一包培养基加两袋半的培养基；所投入的成本是显而易见的，而且效果也许会超出你使用的16-25袋药品的效果；
⒐枯草芽孢杆菌的用量：
各种养殖对象不尽相同，各地的水质环境和养殖模式也有所区别，采用本店铺的枯草芽孢杆菌繁育的菌液我们推荐每亩投放5斤，施入水体后，一定要注意观察，及时开动增氧机进行充氧，防止菌体繁殖及代谢造成水体缺氧，造成不必要的养殖损失现象；在这个基础上，并结合某一个养殖时期的水质状态进行增加或者减少的操作。
在水产养殖中，微生态环境起着养殖生物排泄物及残饵的分解、转化、水质因子的调节与稳定等作用。它的正常与否决定着水质的优劣，进而影响养殖生物能否健康成长。我国的水产养殖多以静水为主，池塘老化严重，自净与调节能力较差，这是预防病害的关键。目前，相对于物理和化学方法，应用微生物治理养殖水体已成为新兴的热点。枯草芽孢杆菌分解、转化和适应能力强，对养殖生物和人体无害，因而目前被大量的用于水产养殖中。
⒈枯草芽孢杆菌的特性
枯草芽孢杆菌呈直杆状，单个，无荚膜，能运动，革兰阳性菌（凡是购买自行繁育的菌体不具备这些特征，则有可能非枯草芽孢杆菌，谨慎在水产养殖上使用，其中蜡样芽胞杆菌不适用于虾类养殖[很多产品混淆视听，简单写芽孢杆菌]），是我国农业部正式批准使用的益生菌，具有菌种单一、对抗生素无耐药性及对水产动物无毒性等特点。作为益生菌特性为：（1）耐酸、耐盐、耐高温及耐挤压。（2）在肠道内不增殖，在肠道的上段迅速发展成具有新陈代谢作用的营养型细胞，参与菌群的平衡调节。（3）提高短链脂肪酸含量，降低肠道pH及氨浓度（4）繁殖过程中产酸、酶和多种维生素。
⒉枯草芽孢杆菌的作用机制
枯草芽孢杆菌在水产动物肠道的作用主要表现在以下几方面：（1）能产生抗弧菌和酵母菌的活性物质，对鱼类嗜水气单胞菌、细菌性败血病病菌、大黄鱼致病菌、中华绒螯蟹致病菌及金黄色葡萄球菌有强烈的抑制作用。（2）繁殖过程中分泌大量的蛋白酶脂肪酶和淀粉酶，能补充机体内原酶的不足，提高饲料的降解和吸收速率，促进水产动物消化。（3）大量好氧，形成肠道厌氧环境，有益于乳酸菌等有益菌增殖，完善肠道生物屏障的作用，抵抗病原菌的定植和侵害。（4）枯草芽孢杆菌细胞的主要成分葡聚糖能发挥免疫刺激物的作用，提高鱼类的非特异性免疫功能。
⒊枯草芽孢杆菌的作用方式
⑴作为饲料添加剂
由于枯草芽孢杆菌能耐受高温高压，保持良好的稳定性和生物活性，因此，当前以饲料添加剂在水产养殖中的应用较多。枯草芽孢杆菌的防病能力源于对养殖对象体内微生态环境的改善和机体免疫力的提高。当枯草芽孢杆菌被吞食人肠道后，消耗氧气，造成充满二氧化碳的厌氧环境，从而扶持和促进双歧杆菌、乳酸菌等有益菌的增殖，有益菌能与肠系膜上皮细胞紧密结合，迅速定植，形成微生物膜，构成肠道生物屏障，阻碍病菌的人侵和定植，又通过发酵作用产生大量乳酸、乙酸，降低肠内pH，维持正常的肠蠕动并使致病菌被排出体外。枯草芽孢杆菌细胞的主要成分葡聚糖，能发挥免疫刺激物的作用，提高养殖对象的非特异性免疫功能。机体吞噬细胞的活性也因枯草芽孢杆菌的进人而被激活，吞噬和消化能力大大加强，从而提高机体的免疫力。饲料中添加枯草芽孢杆菌能提高南美白对虾免疫功能和抗氧化能力，从而促进其生长，适宜添加量为0.05%（干粉计）。饲料中添加枯草芽孢杆菌能有效地提高血细胞的吞噬活性，同时能使克氏原螯虾溶菌酶的产量提高。饲料中添加枯草芽孢杆菌后，斑节对虾的酚氧化酶的活性和抗菌活性得到了提高。
⑵作为水质改良剂
在水产养殖中作为水质改良剂的主要是光合细菌。枯草芽孢杆菌能大量消耗水体中的有机质，将其分解为小分子有机酸、氨基酸及氨，改善水质，为单胞藻提供营养，还可使氨浓度降低，净化水质。在水体中使用枯草芽孢杆菌制剂后，对氨氮、亚硝酸盐和硫化物均有大幅度降低。在蟹池和鱼池中分别加入枯草芽孢杆菌作为水质改良剂发现，其对池塘氨氮、亚硝酸盐氮和硫化物有明显的降解作用，最大降解峰值出现在3~4天，有效时间持续超过7天。因此，作为水质改良剂可视水质情况每7天泼洒全池1次，使用后及时开增氧机，以保证达到最好的使用效果。
⒋枯草芽孢杆菌在水产养殖上的应用效果
⑴虾类养殖中的应用
2002年4月海南英州江海养殖厂进行了斑节对虾精养高位养殖池应用实验，施用枯草芽孢杆菌后，由于枯草芽孢杆菌的繁殖和代谢作用，养殖池中的有害物质——亚硝酸盐、硫化氢减少，亚硝酸盐浓度从0.0769μg/L下降到0.0599μg/L，而同期对照池亚硝酸盐浓度则从0.0677μg/L上升到0.079μg/L；硫化氢对照池浓度在0.00515-0.0246mg/L的范围内波动，而处理池硫化氢浓度10天内从0.068mg/L降到0.0109mg/L，并且开始两天内，更是骤降了0.0422mg/L之多。 衡量水质污染状况的化学耗氧量COD值明显降低，10天内COD值从投放前的9.054下降到8.222，而对照的每次测量值都高于处理池，COD值从9.072上升至9.57并且总碱度（ALK）降低，pH值也维持在适宜对虾生长的安全水平。证明枯草芽孢杆菌能够达到净化水质，优化养殖水体环境，保持养殖池微生态平衡的效果。并研究了枯草芽孢杆菌在虾塘中的消长规律，发现枯草芽孢杆菌施人养殖池后，能够很好的适应海水盐度和渗透压、温度等环境并通过自身的繁殖，使菌数逐渐增加，5-8天达到高峰。因此，投放枯草芽孢杆菌的时间间隔以一周左右为宜。
⑵河蟹育苗中的应用
（2001）在江苏江洋特种水产养殖场河蟹育苗阶段进行投放枯草芽孢杆菌试验：选用8m3的水泥育苗池一组，水温19-25℃。每天投喂12次，其中蛋黄、藻粉各3次，轮虫、枝角6次。对照池每天换水2次，换水量每天15%-30%，312小时共换水7倍，并且先后施用了土霉素、痢特灵、高锰酸钾。试验池312小时中投放枯草芽孢杆菌3次，每次3克，正常投饵，不换水，不用药。试验结果：对照池平均氨氮量为0.313mg/L，试验池为0.285mg/L，比对照池降低8.9%，节约用水85.7%
⒌使用枯草芽孢杆菌的注意事项
（1）枯草芽孢杆菌虽然能够净水防病，但它并非能防止所有病害的发生，养殖者应密切关注水体状况，以多种手段综合防治。
（2）枯草芽孢杆菌并非用的越多越好，因为它是一种好氧菌，过量使用会造成水体缺氧，引发养殖水产品因缺氧而死亡，所以需要在水体施入枯草芽孢杆菌后，及时进行增氧，防止出现缺氧现象，造成损失。
（3）使用枯草芽孢杆菌时，经过扩配培养然后再水体泼洒施入更加高效。因为产品中的细胞均以芽孢状态存在，处于休眠状态，不具备代谢能力，如果直接投人会效果缓慢且不显著；经过培养扩配的枯草芽孢杆菌，不但能够有效快速激活孢子，并且迅速增殖菌体，达到原菌数的N倍，投人水体后，代谢旺盛，能在池塘中迅速增殖，分解大量有机质，效果显著。扩配培养不但有效的节约了成本，提高了单袋菌体的使用面积及亩数，而且会迅速作用水体。
（4）枯草芽孢杆菌不要与杀菌剂一同使用。否则枯草芽孢杆菌会被杀死，起不到净水作用。根据水体状况、养殖密度及天气情况，结合增氧设备，既能保证水体得以净化，又能保证养殖对象的正常活动。
二、枯草芽孢杆菌扩培的相关知识点
⒈充氧设备的选择：充氧泵的功率根据培育水体的体积大小而定，可以采用森森鱼缸用的小型增氧泵，如果培养菌液体积为100斤，则可以采用45W功率的充氧泵，如果培养的菌液体积为200斤，则可以采用55W功率的充氧泵，如果在200斤以上，可以根据实际情况进行充氧泵的选择，充气头全部接入，增加出气量及均匀度，充气头请选择气泡石为最佳；
⒉容器的选择：容器可以选择透明或者不透明的都可以，一般容器体积较大的多为白色或者蓝色；容器的体积根据自己每次的水体泼洒施入量进行选择，可以选择100斤或者200斤甚至更大一点的；
⒊培育环境的选择：培育环境干净整洁，没有扬尘，操作过程越干净越整洁，所能够获得的扩配代数就越多【所以，扩配代数同操作是紧密相关的】，不能置于阳光直射的环境下进行培育，切勿选择错误，其他光线环境均可【晚间无需光照】；
⒋培育水源的选择：水源请选择静止曝气24小时的自来水或者干净含杂菌少的地下淡水；推荐曝气过的自来水（某些地区的地下水重金属超标，对于菌体的繁育会产生负面效应）；
⒌温度：菌体的繁育时间跟温度是相关的；温度在30-35度之间需要5-7小时即可，温度越低，需要的繁育时间就越长；如果在冬季需要使用枯草芽孢杆菌，建议做培养液温度的提升和恒温，保证菌体的繁育时间段为最短，需要置备下列物品：电子温控器、鱼缸潜水泵、u型潜水加热管
⒍菌液成熟的标志：枯草芽孢杆菌的代谢物分为胞外蛋白酶及多种酸类；其中胞外蛋白酶对于有机质分解的作用比较强效；菌液的ph值会随着代谢物酸类的增加而降低至5.8-5.2至以下，菌液的投放时间选择在菌液ph为5.8-5.5之间最为适宜，这个ph段活菌含量最多，孢子数量少；菌液表面张力扩大，泡沫丰富；气味为发酵的酸味；镜检可见：菌体活跃，游动能力强，菌体增殖明显，菌体数量丰富，有机质明显减少；
⒎下面我们就以培育100斤的枯草芽孢杆菌实例讲解下：
准备好容器，加入90斤曝气过的自来水，取本店铺的枯草芽孢杆菌或者您比较信赖的枯草芽孢杆菌200克，充分将其溶解于水体中，然后我们取培养基一袋，并加入10斤温水，温度30度左右即可，并将培养基充分的进行溶解，并将其导入到容器中，并将其混合均匀，至此，100斤菌液配置完毕；接入充氧机，并开始记录ph的变化，在菌液ph在5.8-5.5之间时，即可投入水体的泼洒使用，有条件的养殖人员，可以通过镜检观察下菌体的状态；
菌液成熟后，我们留出10斤作为下次培育100斤的原液，剩下的90斤菌液可以投入使用；由于枯草芽孢杆菌的繁育环境为非密闭性，包括充氧泵的充气状态都决定了在培育的过程中容易遭受杂菌的感染，所以，操作过程越严格，环境越干净，那么可以获得的培育代数就越多；保留菌液容器尽量干净，容器盛满并密封保存，置于遮光黑暗环境下，使菌体全程呈休眠状态或者向孢子转变，待下次培育时再开始启用；
⒏自行繁育枯草芽孢杆菌的优势：
菌体增殖，并全部可以呈现活菌状态，施入水体后，可以快速作用于水体；活菌更加具有抗逆性，快速适应本地的水质环境，不但提高了用量，而且减低了成本；比如：我们一袋枯草芽孢杆菌完全扩配可以作用于25-50亩的水面，如果我们只单独用药品进行投放，则需要投放16-25袋药品，如果我们自行扩配，则只需要一包培养基加两袋半的培养基；所投入的成本是显而易见的，而且效果也许会超出你使用的16-25袋药品的效果；
⒐枯草芽孢杆菌的用量：
各种养殖对象不尽相同，各地的水质环境和养殖模式也有所区别，采用本店铺的枯草芽孢杆菌繁育的菌液我们推荐每亩投放5斤，施入水体后，一定要注意观察，及时开动增氧机进行充氧，防止菌体繁殖及代谢造成水体缺氧，造成不必要的养殖损失现象；在这个基础上，并结合某一个养殖时期的水质状态进行增加或者减少的操作。
