液相色谱柱正确使用方法

一、样品方面
1.除去微粒及杂质
2.了解样品在流动相中的溶解度
如溶样品的溶剂不是流动相，一定要用流动相试溶解度，防止其在流动相中析出
3.了解样品与色谱柱的基质/填料是否有相互作用

二、流动相方面
1.除去微粒
纯度的要求：超纯水，梯度实验时水中有机杂质含量要低；缓冲液的PH值，在填料的允许范围内；缓冲液（盐）的浓度；有机溶剂：色谱纯，杂质含量尽量低，并与填料相匹配
2.流动相对样品的溶解度
有机溶剂或水的比例

三、色谱柱的清洗
对所做的样品要有充分的了解，用对该样品洗脱能力最强的流动相清洗
硅胶柱的一般方法是先用甲醇洗去极性杂质，然后用干燥的二氯甲烷、正庚烷100~200ml依次活化
键合相柱（烷基）的一般方法是用20倍体积的甲醇-氯仿-甲醇-水依次冲洗
（记住：每种色谱柱可能性有特定的方法，一定要先看其使用说明！）

四、色谱柱的存放
存放前的处理要除去杂质、缓冲盐
合适的存放溶剂
避免色谱柱床的干涸
避免机械震动
防止细菌生长
注意存放的温度

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