EB病毒不同感染阶段的抗体阳性情况以及免疫检测策略
1. 实验目的:
采用德国IBL的EB病毒不同抗原的抗体检测试剂盒对不同感染阶段的病人样本进行检测，统计出，不同阶段各种抗体的阳性率。为临床EB病毒的诊断，特别是EB病毒的免疫学诊断提供方法和策略依据。
2. 材料与方法
为了确定IBL EBV ELISA试剂盒的临床灵敏度和特异性，我们总共做了242个样品。其中的样品都取自EBV感染的不同阶段。采用德国IBL的EB病毒不同抗原的抗体检测试剂盒的名称和目录号为：
（1）BE病毒壳抗原IgM抗体ELISA检测试剂盒（EBV VCA IgM ELISA；货号：RE57361）。
（2）BE病毒壳抗原IgG抗体ELISA检测试剂盒（EBV VCA IgG ELISA；货号：RE56281）。
（3）BE病毒壳抗原IgA抗体ELISA检测试剂盒（EBV VCA IgA ELISA；货号：RE56271）。
（4）（3）BE病毒早期抗原IgA抗体ELISA检测试剂盒（EBV EA IgA ELISA；货号：RE56211）。
（5）BE病毒早期抗原IgG抗体ELISA检测试剂盒（EBV VCA IgG ELISA；货号：RE56221）。
（6）BE病毒核抗原IgG抗体ELISA检测试剂盒（EBV VCA IgG ELISA；货号：RE56251）。
抗原血清反应阴性的样品（包括取自小孩的样品）：n=64；急性感染阶段的样品：n=48；再激活感染：n=55；既往感染：n=75。所有的样品都用IF（免疫荧光）分类鉴定的，特别是再激活感染的样品。方法比较，所有样品都已用FDA公认的参考ELSIA试剂盒（EBNA IgG，VCA IgG，VCA IgM和EA IgG）检测过。而EA IgA和VCA IgA还没有FDA公认的参考ELISA试剂盒。
3．结果：结果见下表：不同感染阶段
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用IBL-ELISA试剂盒确定的阳性样品（包括临界值的样品） | ||||||
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N=242 |
VCA IgM |
VCA IgG |
VCA IgA |
EA IgA |
EA IgG |
EBNA IgG |
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急性感染样品48 |
96% |
90% |
75% |
65% |
90% |
0% |
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在激活感染样品n=55 |
0% |
100% |
96% |
76% |
93% |
100% |
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既往感染样品n=75 |
1% |
89% |
47% |
05 |
10% |
100% |
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血清反应阴性样品n=22 |
5% |
14%* |
18%* |
0% |
0% |
0% |
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0-12月的小孩n=42 |
2% |
36%** |
25 |
0% |
2% |
14%** |
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几乎100%阳性
变化的阳性指数 |
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几乎100%阴性
母体抗体 |
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*在EBV血清反应阴性组中，可能包含那种早期无症状的EBV感染人群，因而导致VCA IgM，IgA和IgG结果阳性。
**母体抗体仅代表VCA IgG，EBNA IgG的浓度是非常低的。
4．结论：关于EBV感染不同阶段，IBL EBV-ELISAs试剂盒的灵敏度和特异性
急性EBV感染：如上面的表格所示，我们可以检测三个参数（VCA IgM，VCA IgG和EA IgG，一般检测结果为阳性）和EBNA IgG（一般检测结果为阴性）来确定是否为急性EBV感染。
再激活的EBV感染：与急性感染相比，伴随有或无肿瘤的再激活EBV感染病例的VCA IgM检测几乎100%为阴性，但VCA IgG，VCA IgA，EA IgG和EBNA IgG却明显的表现为阳性，如上表格所示。
既往感染：既往感染有两个明显的阳性参数，分别是VCA IgG和EBNA IgG。除VCA IgA外，几乎其他所有的参数都应该为阴性，在既往感染中，VCA IgA的浓度最长可持续一年。
血清反应阴性病人：血清反应阴性病人的六个参数都应该为阴性。即使VCA IgG, VCA IgA or VCA IgM中的一个参数为阳性，病人也应当是无症状EBV感染。另外，这种单一阳性结果也表明实验稍微有一点非特异性，因为试剂盒有很高的灵敏度，所以它可以识别多克隆刺激所产生的抗体。为了清楚的鉴别出是否为血清反应阴性，我们建议您在7到10天后在重复检测一次。
母体抗体：在出生后6到9个月内，我们可以检测到浓度非常低的母体抗体，如果为既往感染，则VCA IgG和EBNA IgG这两个参数应当为阳性。如上面的表格所示，其他所有的抗体应当为阴性。能检测到母体抗体的事实表明：IBL公司这两个参数的ELISA试剂盒有很高的灵敏度。
