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SNP分型-Taqman
该技术是由美国ABI公司研发的SNP分型技术,该技术操作简单快速,特别适合少量位点大量样本(几千个)的分型项目
服务类别:测序/合成总访问:2530
最后更新:2009-12-21半年访问:11
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分型原理:
该技术是由美国ABI公司研发的SNP分型技术,其技术原理如下简介。PCR 反应时,加入一对两端有不同荧光标记的特异探针来识别不同的等位基因(allele1和allele2),5’端为报告荧光基团(reporter),3’端为淬灭荧光基团 (quencher)。PCR过程中,两个探针能与正向引物和反向引物之间的互补序列特异退火结合。当探针以完整形式存在时,由于能量共振转移,荧光基团只发出微弱荧光。特异的探针与相应的等位基因杂合后,DNA聚合酶发挥5’到3’外切酶活性,把报告荧光基团切割下来,脱离了3’端淬灭荧光基团的淬灭作用 (quench),从而发出荧光。两个探针的5’端标有不同的荧光 (FAM或VIC),3’端标有MGB 淬灭基团结合体。根据检测到的不同荧光,可以判断相应的样本的SNP 等位基因型。
整个技术的示意图如下:

uiTaqman等位基因分型

方法特点
1)该技术操作简单快速,特别适合少量位点大量样本(几千个)的分型项目;
2)探针订购时间长(2-3个月);
3)不适合少量样本(几十个)多位点分型, 特别是频率偏低的位点;

检测实例:
uiTaqman等位基因分型

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