分析方案
一、基因注释(必选)
我们将测序结果进行比对和分析,确定tag代表的基因,用于后续分析。
结果样板:
二、差异基因筛选(必选)
对样品之间进行差异基因筛选。筛选到表达有差异变化的基因。然后对变化基因的趋势进行归类,以方便分析和描述。实例如下图:
三、样品之间的比较分析(推荐)
我们将通过曲线拟合的方法,寻找样品之间趋势差异最大的一些基因:
四、GO(gene ontology)分析(推荐)
对于每一种表达趋势的基因,选择性的进gene ontology:功能分析。 将差异表达的所有基因向gene ontology数据库的各节点映射。计算每个节点的基因数目,并结合整个数据库的基因作为背景分部,对于每个节点,得到一个2x2的表格,使用超几何分布检验基因在每个GO节点的富集或贫乏程度。
五、pathway分析(推荐)
与GO分析类似,我们同样将差异基因使用GenMAPP v2.1向KEGG pathway和BioCarta数据库映射。通过统计方案,找到统计上最有意义的pathway。
六、分析(推荐)Knowledge-driven Network
通过整合PubMed text mining,同源预测,基因neighbor,蛋白-蛋白相互作用,基因融合等数据,建立一个all differentially expressed genes in a single plot的调控网络。这是一种已有知识驱动的网络构建.。
七、转录因子分析(推荐)
利用相关的转录因子(TF)数据库,将差异基因的启动子(基因第一个外显子上游1000bp)提取出来。我们使用HsPD 提供的启动子序列。转录因子数据库使用TRANSFAC 7.0 public。转录因子结合位点预测使用pwmatch 程序,对每个转录因子分析其在上调基因和下调基因的分布情况,利用chi-square test 寻找有差异的转录因子。
八、反义转录本的寻找(可选)
基本流程:
九、新转录本的寻找:(可选)
基本方法:同八
我们对无法注释的tag(un-annotated list)进行基因组定位,并提取上下文序列。利用同源预测或者从头预测程序进行基因预测。一般来讲,同源预测的可靠性较高。而从头预测算法假阳性较高。
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上海敏芯信息科技有限公司
上海敏芯信息科技有限公司成立于2006年10月,是国内知名的生物信息学服务提供商。随着业务扩展,公司已经发展成为国内第一家专业提供系统生物学服务的高科技企业,提供包括基因组学、转录组学、蛋白质组学、代谢组学相关的实验设计、实验检测、数据分析、结果验证及论文修改的全面解决方案。公司已获得国家及上海市中小企业创新基金、上海市科技创新行动计划、上海市大学生创业基金、上海市专利试点企业、上海市技术成果转化认证、上海市杨浦区人才资助资金等多项国家及省部级奖励。
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