基因定点敲除与整合

基因定点敲除与整合就是通过TALEN技术定点敲除基因组上的某一确定的目的基因，或者导入外源的同源序列，通过同源重组将外源基因定点整合入靶细胞基因组上某一确定的位点，以达到定点修饰改造染色体上某一基因的目的的一种技术。它克服了随机整合的盲目性和偶然性，是一种理想的修饰、改造生物遗传物质的方法。

TALEN的中文名为转录激活因子样效应物核酸酶，是基因组编辑核酸酶三大类之一。TALEN是一种可靶向特异DNA序列的酶，它借助于TAL效应子一种由植物细菌分泌的天然蛋白来识别特异性DNA碱基对。TAL效应子可被设计识别和结合所有的目的DNA序列。对TAL效应子附加一个核酸酶就生成了TALENs。TAL效应核酸酶可与DNA结合并在特异位点对DNA链进行切割，进而在该位点进行DNA操作，如Knock-out、Knock-in或点突变。

TALEN技术优势：

1.无基因序列、细胞、物种限制；

2.TALE的核酸识别单元与A、G、C、T具有恒定的对应关系。实验设计简单准确、实验周期短、成本低；

3.成功率几乎可达100%。毒性低，脱靶率低，目前尚未发现明显脱靶效应；

4.克服了常规的ZFN方法不能识别任意目标基因序列，以及识别序列经常受上下游序列影响等问题，并且具有比ZFN更高的打靶活性；

5.TALEN技术是在DNA水平上进行的基因敲除，彻底解决了RNA干扰技术仅在mRNA水平上Knock down的瓶颈，且TALEN技术已经成为未来基因组修饰的趋势！

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