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一文揽尽:荧光定量PCR扩增曲线哪个阶段最重要
2021-11-17
qPCR扩增曲线一般分成四个阶段:基线期、指数期、线性期和平台期。那么每个阶段PCR产物量的变化都有什么区别呢?哪个阶段最重要呢?小编这就一一道来。基线期PCR起始时,刚开始前几个循环的荧光
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针对新手专用PCR原理讲解与分析
2021-11-9
什么是实时荧光定量PCR(qPCR)?在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过Cq值和标准曲线对起始模板进行定量分析的方法。一.使DNA产物发出荧光的常用标记方
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次
Azure Cielo™ 实时荧光定量PCR系统在快速可靠地检测新冠病毒的应用
2021-11-3
在应对病毒性大流行疾病时,为了有效控制病毒传播和减少感染人群,快速且可靠的诊断是至关重要的。那么目前检测COVID-19的 "黄金标准 "依赖于一种成熟的技术,即反转录定量聚合酶链反
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新手须知的qPCR操作技巧详解(下篇)
2021-8-26
上一篇文章跟大家介绍了qPCR实验中引物设计及加样的相关操作技巧,今天我们再跟大家分享其他的实用技巧,这些入门级知识一定要掌握牢固哦。1、阴性对照的技巧:阴性对照一般是指用水代替模板的反
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MeRIP-qPCR方法原理、结果含义、展示方法及应用细谈
2021-8-10
m6A等RNA修饰的主要研究手段是通过MeRIP方法对发生修饰的片段进行富集,其后进行高通量测序分析修饰位点。而无论是一篇仅展示修饰位点分布特点的谱学文章,还是深入研究修饰调控基因表达机制的文
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PCR Efficiency在线分析工具在预测PCR扩增效率的使用
2021-7-30
目前已开发多种工具可以进行PCR引物的设计,但大多数工具只考虑避免发夹结构形成、3'末端核苷酸的选择、引物解链温度等问题,并没有考虑内在扩增子的特征以及没有预测给定扩增子和引物对的P
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新手须知的qPCR操作技巧(上篇)
2021-7-30
实时荧光定量 PCR(qPCR)自问世以来,就受到了广大生命科学实验工作者和医院检验工作者的极大关注,使得该技术得到了很快的普及。虽然qPCR技术目前应用方向十分广泛,但是仍碰到很多用户在实验
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次
荧光定量PCR实验流程中常见的阴性对照与阳性对照介绍
2021-7-15
什么鬼?实验结果又不理想,Ct值怎么又这么大呢?是哪一步出现了问题呢?哎哎哎,怎么没有扩增曲线呢?在您看到荧光定量 PCR 实验结果时,是不是也发出过这样的疑问呢?总感觉哪个实验步骤出现了
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次
qPCR性能分析的四大要素-效率、线性动态范围、检测限和精密度
2021-6-28
MIQE指南中明确提出,进行qPCR实验时必须测定以下检测性能特点:PCR的效率、线性动态范围、LOD和精密度。1、PCR的效率:强大和精确的qPCR测定通常具有高效率。在报告目的基因相对于参照基因的mR
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次
实时荧光定量PCR引物设计原则中扩增子大小对qPCR产量影响的应用
2021-6-11
一般情况下,实时荧光定量PCR引物设计原则中会提到扩增子大小对实时荧光定量PCR的扩增效率有一定作用。所以通常建议使用相对较短的扩增子长度,范围为50到150个碱基对(bp)。由于小片段不太容易
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次
MIQE中核酸质量控制环节的操作简易说明
2021-6-3
RNA样本:比较不同的样本时,应保证各样本中含有大致相同量的RNA,因此需要对所提取的RNA进行定量。常用的定量方法包括:分光光度法、荧光染料检测、琼脂糖凝胶电泳、毛细管凝胶电泳和3':5
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超敏一步巢式Taqman qPCR荧光核酸检测技术的机理及应用优势
2021-3-23
巢式PCR具有很高的灵敏度和特异性,但传统的巢式PCR采用两对引物,通过两轮PCR,进行目标产物的扩增。这种操作的不便性,使得其高灵敏度的特性难以应用到快速检测和临床诊断中。在单管巢式PCR的
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无需ROX校准的Azure Cielo™ Real-Time PCR光学系统的应用
2021-1-29
ROX是一种广泛使用的惰性荧光染料,通常添加到qPCR反应液中以校正荧光信号。然而,随着荧光技术在仪器中的发展,比如在Azure Cielo™实时荧光定量PCR系统,为了标准化而单独使用染料的步骤
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ac4C荣登Nature-RNA修饰研究大有可为
2020-10-20
RNA修饰是表观遗传学中调控转录后基因表达的关键过程,目前对m6A RNA修饰的研究已进行的如火如荼,但除了m6A以外仍有多种RNA修饰类型参与调控转录后的基因表达,其中包括m1A、m5C、m7G、2&rsquo
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去甲基化酶ALKBH5在胰腺癌中的应用
2020-7-9
文章导读表观遗传修饰如m6A甲基化在肿 瘤的发生和发展中起到重要作用。而甲基化酶对ai症的影响也受到广 泛关注。其中去甲基化酶ALKBH5已被报道过能通过维持乳腺ai细胞的干细胞性而促进肿 瘤的形
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PCR疑难问题粉碎机:逆转录PCR的操作要点与方法
2020-6-30
【前情回顾】PCR疑难问题粉碎机(一)——终点PCR 【前情回顾】PCR疑难问题粉碎机(二)——荧光定量PCR 逆转录 PCR(Reverse TranscriptionPCR, RT-PCR)是一种以 RN
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次
PCR疑难问题解答第二篇:荧光定量PCR
2020-6-16
【前情回顾】PCR疑难问题粉碎机(一)——终点PCR 实时荧光定量PCR(quantitative PCR, qPCR)通过对PCR扩增反应中的每一个循环产物荧光信号的实时监测从而实现对起始模板的定性
884 次
30分钟的精确定量-染料法荧光定量PCR
2020-5-14
【前情回顾】 【1】PCR试剂选择困难症?其实可以很简单!点击了解 【2】高分辨率熔解曲线(HRM)分析预混Mix(PCR),用于基因筛查?点击了解 【3】飞行时间质谱(MALDI-TOF)法SNP分析(P
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RT-qPCR常用的SYBR@Green I双链DNA结合染料的应用
2020-5-13
随着新冠病毒肆虐全球,聊病毒是个敏感话题。今天我们就从这个敏感话题着手,好好聊一聊。 病毒是一种个体微小,结构简单,只含一种核酸(DNA或RNA)。我们现在提起来就咬牙切齿的的新冠病毒
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如何提高PCR的扩增特异性
2020-5-11
疫情当下,最热频的词汇莫过于核酸检测了。而核酸检测最核心的技术也越来越被大众所熟知,就是我们高中就学过的聚合酶链式反应,又称为PCR。 自从1983年,Kary Mullis才发明出这个用于扩增
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