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3453 次 RT-PCR逆转录技术详解 2022-12-27
前言RT-PCR就是逆转录PCR（Reverse transcription PCR）或称为反转录PCR（Reverse transcription-PCR，RT-PCR），是以RNA为材料应用于PCR扩增中的一种实验方法。首先通过逆转录酶将总RNA或信使R
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1566 次 PCR盖紧盖子试剂蒸发问题详解 2022-12-6
导读在PCR实验中，我们加完反应体系后，都会认真仔细的盖好盖子，并反复确认已经盖好了盖子，以避免出现试剂蒸发的情况。可是有时候我们也会有一些疑惑：明明已经确认盖子盖紧了，实验结束后，还
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4038 次 荧光定量PCR对照详解 2022-11-4
前言吾日三省吾身，定量实验做对照了吗？在荧光定量PCR实验中遇到没有曲线、曲线异常等情况，我们总是会在第一时间去看阳性对照和阴性对照的扩增情况来分析原因。由此可见，实验中做对照的重要性
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2272 次 PCR耗材选择的问答详解 2022-10-25
导读俗话说的好，工欲善其事，必先利其器。耗材的选择对得到满意的PCR实验结果至关重要。在分析PCR结果时，我们往往侧重于对引物、酶的浓度、温度和时间的分析，却忽略了PCR耗材也是影响因素之一
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1824 次 多重PCR技术要点解析 2022-10-20
多重PCR概述多重PCR(multiplex PCR)，又称多重引物PCR或复合PCR，它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物，同时扩增出多个核酸片段的PCR反应，其基本原理与常规PCR相同，区别在于多重PCR反应体
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2378 次 Taq酶选型三要素：扩增效率、酶动力、灵敏度 2022-9-5
导读目前国内市场上销售的热启动Taq酶的品牌很多，但真正高质量的热启动Taq酶并不多，面对这么多的热启动Taq酶产品，我们应如何选择？首先，选择扩增效率高的热启动Taq酶耐受性好的Taq酶反应体系
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4033 次 qPCR体系优化和常见问题解析大全 2022-8-15
前言聚合酶链式反应（PCR）是用于扩增特定DNA片段的分子生物学实验技术。实时荧光定量PCR（以下简称qPCR）作为第二代PCR技术，自1996年推出以来，已经广泛应用于基因表达分析、病原微生物检测、
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3908 次 普通PCR引物与qPCR引物的对比与选择详解 2022-8-3
导读说起引物，大家都再熟悉不过了。引物，在核苷酸聚合作用的起始时，可以刺激合成另一种大分子，并与反应物以共价键形式连接的序列。在核酸化学中，引物是一段短的单链RNA或DNA片段，可结合在
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4177 次 荧光定量PCR实验中荧光标记的选择详解 2022-7-22
荧光定量PCR技术是将常规的PCR和荧光检测技术相结合，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，以此实现对初始模板的定量分析。荧光定量PCR技术作为当今生物学研究的重要手段之一，在基础科学、生
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1484 次 qPCR实验之核酸提取MIQE明确的要点详解 2022-6-22
前言MIQE是描述评估qPCR实验所需的最小信息，该指南是稿件投稿时需要同时提交的一个清单。通过作者提供相关的实验条件和实验特点，审稿人可以评价实验所用方法的可靠性。另外提供详细的实验所用
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1234 次 qPCR实验中安全科学地取材操作详解 2022-6-10
规划一个qPCR实验时，最先碰到的问题就是研究目的和材料的选择。要想做好一个qPCR实验首先要根据目的选好材料。以目标为导向的取材研究目标的设立是非常重要的一个起始环节，所以对于样本取材要
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3116 次 如何处理实时荧光定量PCR的数据详解 2022-6-6
实时荧光定量PCR数据中的基本概念：在整个扩增过程中会出现基线期，指数期，线性期和平台期。其中在基线期和指数增长期，扩增产物都是以指数级增长，但是在基线期我们没办法检测；而到了线性期和
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2257 次 PCR原理、PCR扩增影响因素及预防详解 2022-5-10
PCR简介聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR)是利用一段DNA为模板，在DNA聚合酶和核苷酸底物共同参与下，将该段DNA扩增至足够数量，以便进行结构和功能分析的一种反应。PCR扩增原理核
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5985 次 qPCR扩增过程中影响Ct值的因素及解决办法详解 2022-4-27
导读Ct值是荧光定量PCR重要的结果呈现形式，它被用于计算基因表达量差异或者基因拷贝数。那么荧光定量的Ct值多大被认为是合理？如何保证Ct值的有效范围呢？ Ct值以及Ct值的作用：Ct值概念：也称
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3512 次 实验过程中核酸降解的预防手段与方法 2022-4-14
导语在实验过程中，最心累的莫过于好不容易提取的核酸却降解了。那么核酸为什么会发生降解呢，我们又该如何预防呢？关于核酸降解，你了解多少呢？让我们一起对核酸降解一探究竟吧。 什么是核酸
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2011 次 移取PCR Master Mix对qPCR结果的准确性的影响 2022-3-30
Overview定量聚合酶链反应（qPCR）分析具有高灵敏度，这是其成功并广泛应用于科学实验室的最重要原因之一。然而，包括移液技术在内的许多因素都会对qPCR分析的结果产生影响。在进行基于PCR原理的
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1156 次 如何改进qPCR数据报告 2022-2-24
关于实时荧光定量PCR技术，最常见的应用是通过RT-qPCR进行基因表达分析、疾病诊断和管理（如病毒定量）、食品检测（如转基因或过敏原分析）以及动物或植物育种等研究。这种方法非常灵敏，因此为
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3612 次 影响qPCR最终效果的六个要素分析与解决方法 2021-12-14
实时荧光定量PCR：在PCR反应体系中加入荧光基团（探针或染料），利用荧光信号积累实时监测整个PCR反应过程，最后通过Cq或Ct值和标准曲线对起始模板进行绝对定量或相对定量分析。而评估荧光定量P
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7230 次 qPCR扩增曲线的问题综述与解决方法总结 2021-12-1
大家好！首先跟大家做一个自我介绍：我是扩增曲线，来自荧光定量PCR，是用于描述qPCR动态进程的曲线，我有两种形态，一种是线性图谱：横坐标是循环数，纵坐标是荧光强度值；另一种是对数图谱：横
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1577 次 Azure Cielo™实时荧光定量PCR系统在检测低拷贝端粒基因的应用 2021-11-24
我们都知道在实时定量PCR（qPCR）中，可以通过Cq值和标准曲线得出样本的初始拷贝数。但Cq值与样品中靶标的拷贝数有关，也会受到PCR反应的效率和仪器检测灵敏度的影响。高灵敏度的仪器可以减少检