用WMicrotracker Arena系统测定左旋咪唑毒性

左旋咪唑是一种合成驱虫药，广泛应用于兽医学中，用于治疗由线虫引起的寄生虫感染。作为一种驱虫药，它以线虫乙酰胆碱离子通道受体为靶点(Martin等)。除了医学应用外，左旋咪唑还广泛应用于各个研究领域，特别是秀丽隐杆线虫麻痹实验。它能诱导这些线虫瘫痪，这对于研究神经元功能和肌肉生理学来说是无价的。为了深入了解毒理学实验，我们在下面举一个利用这种化合物的例子。研究人员可以利用这个例子作为一个框架，使用不同的可溶性药物进行他们自己的毒性研究。

材料:
带盖6孔板，NGM培养基，M9缓冲液，左旋咪唑-原液:100mM水溶，同步成虫种群，WMicrotracker Arena设备。

简易操作：

 
微孔板制备:

• 按照标准程序制备NGM；
• 在加入盐和胆固醇后将左旋咪唑立即加入55°C的NGM琼脂溶液中；
• 左旋咪唑片未接种OP50中；
• 制备后两周内可使用，保存在4°C的容器中；
• 测定是在实验开始前已将模板降到室温的板上进行的。

 
Protocol步骤:

1，在NGM培养皿中培养同步的成虫种群(OP50)；
2，用M9缓冲液将蠕虫从培养皿中取出，转移到15毫升无菌试管中；
3，让虫子静下来。倒入上清液，注意不要扰乱颗粒；
4，用5ml M9缓冲液进行清洗。短暂摇动或翻转管子；
5，重复上述步骤。倒出上清，加入3ml M9缓冲液；
6，数一式三份，计数每10ul中虫数，计算平均值；
7，制备悬浮液，得到[35虫/10μl]；
8，将10 μl虫液转移至6孔板；
9，使用wMicroTracker ARENA观察蠕虫活动；

备注:至少进行3次技术重复，至少进行2次生物重复。

实验结果如图所示：

左旋咪唑对N2运动活性的剂量抑制反应曲线

评价不同浓度左旋咪唑(0µM(对照)、100µM和200µM)的治疗效果。在6孔板中，每孔挑选35个年轻成虫N2。在23℃下记录4小时的运动活动。数据代表四个独立实验的平均值，进行重复实验。

欢迎关注进科驰安官方微信（微信公众号：Bio-Gene）
回复：行为测定，查看更多相关视频
长按/扫描以下二维码可识别关注公众号

广州进科驰安科技有限公司
Bio-Gene Technology Ltd.
热线：176 2009 3784
www.bio-gene.com.cn
marketing@bio-gene.com.cn
香港 北京 上海 广州 成都 济南