SMART检测左旋咪唑对NGM系统培养秀丽隐杆线虫的影响

许多胆碱能药物已被用于分析特定的突变体和行为;然而，对秀丽隐杆线虫神经生物学影响最大的两种药物是涕-灭-威和左旋咪唑。使用WMicrotracker SMART，可以很容易地量化乙酰胆碱通道调节剂的作用和动力学，以及其他参与行为的神经元通道。WMicrotracker SMART是我们的新技术，通过它你可以获得小动物种群在时间和空间上的行为的详细信息，包括多蠕虫路径跟踪。下面我们给出一个应用程序示例。

P35中左旋咪唑对秀丽隐杆线虫麻痹的动力学研究
 
WMicrotracker SMART能够获取并绘制一群蠕虫的路径跟踪，实时计算平均移动速度。左旋咪唑浓度处理(0至200uM)的动力学图如下所示。图中显示了左旋咪唑浓度与运动速度下降的相关性。

利用每小时5分钟的采集延时，WMicrotracker SMART能够量化左旋咪唑麻痹对秀丽隐杆线虫的影响。

Protocol步骤：

1，在NGM培养皿中同步培养日1虫成虫种群(OP50)。
2，用M9缓冲液将蠕虫从培养皿中取出，并将其转移到无菌2ml微管中。
3，让虫子静下来。倒入上清，注意不要扰乱颗粒；
4，用2ml M9缓冲液进行清洗。短暂摇动或翻转试管；
5，重复上述步骤。把上清倒掉；
6，加入2ml M9缓冲液；
7，计算10µl内的虫数，一式三份，计算平均值；
8，准备悬浮液，得到[25虫/10µl]；
9，将10µl蠕虫溶液转移到35mm板上，等到水滴被吸收。
10，5分钟后，在5分钟内使用WMicrotracker SMART注册蠕虫活动。在获取之前，通过对平板进行机械刺激来刺激蠕虫。

微孔板准备：

按照标准程序制备NGM；
在加入盐和胆固醇后立即将左旋咪唑加入55°C的NGM琼脂溶液中；
左旋咪唑板未接种OP50；
测定是在实验开始前已将模板降到室温的板上进行的；
在将蠕虫添加到每个板之前，在每个板的边缘做一个100mm硫酸铜环，以防止蠕虫爬出琼脂；
当添加蠕虫时，要小心不要刮伤琼脂-蠕虫往往会爬进琼脂表面的任何裂缝；

在本实验中，我们观察了左旋咪唑处理在NGM培养基中培养的秀丽隐杆线虫群体中的动力学效应。

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