2D与3D实时可视化细胞趋化实验操作详解

趋化性试验用于分析某种细胞类型是否直接向特定趋化因子定向和迁移。由于趋化性在癌症发展和免疫浸润过程中是一个特别重要的过程，趋化性试验中常用的细胞类型是癌细胞和免疫细胞。

趋化性试验可以研究：

• 目的基因敲除、敲低或过表达后细胞的趋化行为

• 物质的趋化潜力

• 趋化性抑制剂和增强剂的作用

• 趋化性和化学运动性之间的区别（增强迁移）

• 趋化过程中的细胞信号转导

• 趋化过程中细胞骨架的变化

  

 HT-1080细胞转染LifeAct-TagGFP2 在2D表面上趋化迁移。
 

许多细胞自然生长在3D环境中。体外培养时，细胞附着在平坦的2D表面上，其行为可能与在3D凝胶基质中不同。在许多情况下，3D环境更接近体内情况，在规划趋化性试验时应考虑到这一点。

使用µ-Slide Chemotaxis，可以轻松在水基凝胶（如Ⅰ型胶原蛋白和 Matrigel）中建立趋化梯度，因为凝胶结构不会阻碍扩散。感兴趣可以联系我们有关 3D 趋化性测定的优点和缺点的更多信息。

HT-1080 癌细胞在 2D 表面上粘附（左）并嵌入 3D I型胶原蛋白（右）的显微镜观察示意图。
 

• 在 ibidi µ-Slide Chemotaxis中，细胞会迁移，并且可以在连接两个大型储存器的中央通道中观察到  

• 具有长期稳定性的明确线性梯度 

• 实验起点的细胞分布均匀 

• 非常适合使用倒置显微镜进行活细胞成像  

• 适用于：

- 2D 和 3D 检测 - 快速和慢速迁移细胞 - 粘附和非粘附细胞

使用 µ-Slide Chemotaxis，可以在 3D 凝胶基质或 2D 表面上培养细胞。本示例展示了凝胶基质中迁移细胞的 3D 实验。

μ-Slide Chemotaxis是为研究快速或缓慢迁移、非粘附或粘附细胞在 2D 表面或 3D 凝胶基质上的趋化行为而开发的。可以观察到 48 小时以上线性和稳定浓度分布中的细胞迁移。由于梯度快速建立，因此还可以测量快速迁移响应（发生在 30 分钟内）。

使用µ-Slide Chemotaxis可以对各种细胞类型（例如内皮细胞、成纤维细胞、癌细胞和免疫细胞）的迁移行为进行详细而明确的分析。

参考：

Zengel P, et al. (2011) μ-Slide Chemotaxis: a new chamber for long-term chemotaxis studies. BMC Cell Biol 12:21. 10.1186/1471-2121-12-21.
 

Biswenger V, et al. (2018) Characterization of EGF-guided MDA-MB-231 cell chemotaxis in vitro using a physiological and highly sensitive assay system. PLoS One 13(9):e0203040. 10.1371/journal.pone.0203040.

• 细胞从过滤器或多孔膜的一侧迁移到另一侧，也称为跨孔细胞迁移试验 

• 终点法分析：在进行跨孔迁移分析时，迁移细胞在膜背面计数，因此无法分析细胞路径 

• 陡坡 

• 实验起点处的细胞分布不均匀；细胞仅位于膜的一侧

  

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