细胞疗法新技术之ACTL疗法的简介、机制及DC细胞的相关作用
ACTL靶向性抗肿瘤免疫技术，简称ACTL技术，是目前使用的最新的抗肿瘤生物治疗技术。ACTL肿瘤细胞靶向治疗技术临床应用的典型例子为斯坦曼教授自身晚期胰腺癌的治疗和苹果公司乔布斯晚期胰腺癌的治疗。目前已经获得多个欧美及国际专利。
此疗法具有多方面优点：①AAV病毒是经过认证的病毒载体，具有良好的安全性；②肿瘤抗原决定簇诱导CTL精确靶向肿瘤细胞，病毒载体转染效率高，具有高效精准的特性；③适应症广。因此对于肿瘤的精准治疗是集多种优势于一体的细胞治疗技术。
02 ACTL疗法机制
基本流程通过采集患者的免疫细胞，在体外用携带肿瘤相关抗原基因的基因工程载体感染单核细胞，在细胞因子的诱导作用下分化为树突状细胞（DC细胞），激活细胞毒性T淋巴细胞（CTL细胞），使其在回输患者体内后可以精准识别肿瘤细胞，达到杀伤的目的，而对正常组织细胞无作用。其中CTL的杀伤机制是释放穿孔素，颗粒酶，裂解靶细胞，通过FasL介导靶细胞的凋亡（如图1）。
图1：ACTL疗法流程及机制
03 DC细胞作用和培养
DC细胞的功能特点：DC细胞作为抗原提呈细胞，拥有强大的抗原提呈能力，将抗原提呈给免疫细胞激活先天性和适应性免疫，是免疫系统的“司令塔”。
DC细胞的培养：
在ACTL疗法中，会进行DC的分离培养，目前DC可以从骨髓、外周血和脐带血的DC前体细胞定向诱导、分化并扩增而得，其中外周血由于取材简单，所用的细胞因子组合少，是获取DC的较好途径。
DC的分化发育需要多种细胞因子的刺激和培养，GM-CSF能够促进DC生成，是最早被鉴定出对DC有作用的因子之一，能增殖DC的抗原提呈功能，有助于DC的存活。IL-4作用是促进DC前体细胞分化为CD14-/CD1a-未成熟DC细胞，同时抑制DC前体细胞向巨噬细胞分化，若培养体系中不加IL-4，单核细胞将分化为巨噬细胞。GM-CSF和IL-4的共同作用可使单核细胞定向分化为未成熟的DC。TNF-α/IL-1β/IL-6这三种因子使未成熟的DC分化为成熟的DC，可在无血清的条件下诱导DC的完全成熟，从而制备出可应用于临床的DC。IFN-γ加入可以促进DC的成熟。（如图2）
图2：DC分化成熟过程
同立海源生物可提供用于单核细胞分化为DC细胞的GM-CSF, IL-4, TNFα , IL-6, IFN-γ等一系列的细胞因子
细胞因子TNFα(Cat.No.GMP-TL303)在代谢抑制剂放线菌素D存在下，用L929细胞进行细胞毒性测定，比活性＞1.0×107 IU/mg。
细胞因子GM-CSF(Cat.No.GMP-TL302)用TF-1细胞进行细胞增殖实验测定，有高活性和批次间稳定性特点，比活性＞5.0×106 IU/mg。
细胞因子IL-6(Cat.No.GMP-TL512)在刺激TF-1细胞增殖实验中，显示出高活性，其比活性＞2.0×107 IU/mg。
完善的GMP质量管理体系保证产品的安全性、有效性
❖ SDS-PAGE＞95%
❖ 内毒素＜0.1EU/μg
❖ DNA残留≤100pg/ml
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❖ 支原体、无菌、外源因子检测
❖ 理化性质，符合规定
同立海源生物依托B+A级洁净车间，自主研发多款可用于T细胞、NK细胞、CIK等免疫细胞和iPSC为代表的干细胞热门应用领域相关产品，如IL-7, IL-15, IL-21等高活性的GMP级别细胞因子，产品已通过美国FDA备案，可更好的助力临床研究及IND申报，为您的CAR-T, CAR-NK工艺保驾护航。
