类器官培养常见问题汇总
A1：类器官中多种不同类型的细胞，可以在体外自我分化自我组装，具有干性可以进行传代；肿瘤球只有单一细胞。
A2：动物源性的样本一般比人源的更容易污染，尤其是一些胃肠、泌尿系统，培养过程可以添加一些庆大霉素或者抗生素。
A3：一般IC50用的比较多。
A4：因为类器官中有多种细胞类型，并且是一个腔状的结构，所以不会吸收不到营养。
A5：组织的大小建议黄豆大小；IPS主要是干细胞诱导的，周期比较长，优点在于纯度比较高，但是一般不能传代。
A6：类器官做药筛是目前的一个新的趋势，后续应用会更广泛一些。
A7：一般建议是长到200-300um可以加药，传代的第2代或者第3代。
A8：IC50 主要是对药物敏感性的判断，与用药的浓度是有一定关系的。
A9：举例：如果是检测化合物，化合物中都有IC50值，我们直接扩大1000倍。
A10：可以加基质胶，也可以不加。
A11：用DMSO做对照即可。
A12：主要看类器官的干性，干性比较好可以传20代以上；冻存液需要类器官专用的无血清冻存液。
A13：主要看类器官生长的情况，一般是100-200um.如果类器官初始体积就比较大，直径会更大一些。
A14：原理上是可以的，把基质胶铺薄一些让其贴壁，再把培养基换成常规血清培养基。
A15：因为原代细胞是单一细胞系，一些增殖的基因会起到抑制作用，但是类器官中是有干细胞的，每一代的类器官中都有一些具有干性的原代祖细胞，所以可以一直传代，而且类器官的培养基可以保持细胞干性，抑制其分化能力。
A16：一种是观察明场图片，另外就是终点法，像比较常见的CCK8、ATP细胞活性检测、活死染色法也可以。
A17：比较常见的是CCK8检测、ATP细胞活性检测、活死染色法。
A18：建议3-5代是比较好的。
A19：常规显微镜4倍镜下进行计数即可；另外可以用细胞计数仪进行计数。
A20：200-300um;建议是在加药后120小时以上。
A21：这种属于肿瘤球构建。
A22：有专用的类器官消化液，还可以借助一些机械的消化手段，一般是1-2min,千万不要用胰酶消化。
A23：用我们爱必信的消化液是10-15min,常规文献中的要根据不同组织类型去判断。
A24：可以的，但是纯度是不一样的。
A25：药物并一定要渗入到深层，作用一部分的就会起作用，因为类器官之间是相互作用的，这一点区别于肿瘤球，主要是肿瘤球中间是没有缝隙的。
A26：差别比较大的，每个类器官的形态都是有一定的区别。
A27：建议每2天拍一次，培养过程多进行观察，有条件可以每日观察。
A28：每个孔建议是50个类器官，因为类器官没有办法计数，所以每个孔多少还是会有差距。
A29：不建议这样操作，建议把类器官悬浮在缓冲液或者培养基中进行染色。
A30：是正常的。因为肺在长过程是会有一个M1型到M2型的转化的。
A31：不同厂家离心力不同，提议自己摸索实验室转速，适当提高。
