应用纪要:富集和脱盐的超滤解决方案
浏览次数:1692 发布日期:2022-7-29
来源:赛多利斯
富集和脱盐是对生物分子进行分析需要进行的前处理之一。这些生物分析方法包括对纯化时收集到的组分进行组织培养实验,洗脱峰进行SDS-PAGE电泳。以及对样品进行结构和纯度分析时进行的质谱分析、毛细管电泳、傅里叶红外光谱分析等等。
与脱盐柱仅能实现脱盐不同,
对检测样品进行超滤,用超纯水进行缓冲液置换,可以快速实现脱盐的同时也对样品进行了浓缩,同时实现了脱去盐分和提高浓度的目的。如果同时检测的样品很多,超滤的优势就更加明显了,看看这么多小兄弟齐上阵,效率杠杠的!不得不说,超滤真的是一个一举三得的好方案。
让我们一起来认识一下超滤家族的小兄弟
Vivaspin 500和
Vivacon 500还有哪些超能力?
样品量低?担心回收率
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Vivaspin 500
我采用的是超快流速的PES膜,有快速能力做保障,因此我只有单面膜,非特异性吸附降低一半。
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Vivacon 500
我采用的是极低吸附的Hydrosart膜,而且是膜面积非常小的横膜,最大程度降低非特异性吸附。
效率如何进一步提高?
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Vivaspin 500
悄悄告诉你,由于我只有单面膜所以底部空间较大,离心后吸头正好插入底部完全回收,不用反转离心哦。
平行样品间如何获得
尽量一致的浓缩倍数?
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Vivacon 500
我是平面膜尽量保持离心力一致即可;
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Vivaspin 500
我是切向流单片膜,除了离心力外还要注意每一个小兄弟都保持刻度面朝上放置;如果使用的是市面上其它双面膜的产品,尽量使两个膜片侧向相对,而不是上下相对。
如何避免超滤管上的
保护剂干扰检测结果?
我们的超滤膜上有痕量的甘油和叠氮化钠用来避免膜干燥。通常这些保护剂不会干扰检测。但因为后续的检测不同,如果有干扰可以用缓冲液和纯净水对超滤管进行预润洗。如果仍对检测有影响,还可以用0.1N的HCl进行预润洗,去掉干扰峰。Vivaspin 500 有PCR grade的产品,进行核酸分离时如需要避免核酸的污染,可以采用。
1剑桥大学的科学家在进行胰岛素A链肽段(MW 2.5kD)和降钙素(MW 3,593 Da)研究时,采用Vivaspin 500 3kD的产品在13000rpm 离心对它们进行浓缩。尽管两种蛋白的分子量很小,但回收率分别达到了98%和99%。
我们超滤小兄弟有多种孔径:
Vivaspin 500
(3kD,5kD,10kD,30kD,50kD,100kD,300kD,1000kD)
Vivacon 500
(2kD,10kD,30kD,50kD,125kD)
无论处理病毒、蛋白、核酸样品均可大显身手。
百闻不如一试,
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*试用名额有限,先到先得
*本活动的最终解释权归赛多利斯中国所有
-参考文献-
1.Alan R. Johnson, Christine Turner
Anatomy Department, University of Cambridge, Downing Street, Cambridge, CB2 3DY. UK
Lab filtration Application note 2001