致泻大肠埃希氏菌标准菌株

11月22日实施的GB 29921-2021《食品安全国家标准 预包装食品中致病菌限量》中，将对牛肉制品和生食果蔬制品的 “大肠埃希氏菌 O157:H7”限量指标修改为“致泻大肠埃希氏菌”，并扩大至即食生肉制品和发酵肉制品类。
现行致泻大肠埃希氏菌的检验方法是GB 4789.6-2016 《食品安全国家标准 食品微生物学检验 致泻大肠埃希氏菌检验》。根据标准要求，在做PCR确认实验时，“每次PCR反应使用EPEC、EIEC、ETEC、STEC/EHEC、EAEC标准菌株作为阳性对照。同时，使用大肠埃希氏菌ATCC 25922或等效标准菌株作为阴性对照”。

CICC整理了7株标准菌株的典型特征照片和描述，供检测实验室参考。

形态学

左：麦康凯（MAC）琼脂培养基，36 ℃培养24 h，菌落砖红色至桃红色，圆形，表面光滑，菌落周围培养基呈粉红色。

右：伊红美蓝（EMB）琼脂培养基，36 ℃培养24 h，菌落紫黑色，带或不带金属光泽，圆形，表面光滑，边缘整齐。

关键生理生化

三糖铁实验：

a. 空白对照

b. 斜面产酸变黄，底层产酸变黄，不产硫化氢，产气。

氰化钾、靛基质、尿素酶实验：
a. 氰化钾对照：浑浊。
b. 氰化钾：阴性，不浑浊。
c. 靛基质：阳性，粉红色。
d. 尿素酶：阴性，黄色。


特征基因

株大肠埃希氏菌毒力基因电泳检测结果

注：电泳图中相关标记释义：M, DL2000 Marker; 1, uidA; 2, aggR; 3, astA; 4, pic; 5, bfpB; 6, escV; 7, stx1; 8, stx2; 9, lt; 10, stp; 11, sth; 12, invE.

 

7株大肠埃希氏菌特征性基因序列分析