稳定、经济的灌流培养工艺控制策略要点

赛多君@你
这一期非同反响的直播回顾
我们已经准备好了！
 
主讲嘉宾
夏忠武
赛多利斯上游产品应用专家
 
主要内容
 
■ 目前常见增强培养工艺及其特点介绍
■ 灌流工艺控制主要考量点分析
■ 前沿稳健，经济的灌流培养工艺控制策略
Q1
请问有什么方案可缓解ATF柱体的堵塞情况？
 
答：对于缓解ATF柱堵塞，可尝试以下方法：
1.维持较高细胞活力。
2. 通过bleed控制细胞密度在合适水平。
3. 通过浓缩补料的方式降低换液速率。
 
Q2
灌流培养工艺蛋白质量与摇瓶工艺蛋白质量不一致如唾液酸等，从哪些方面入手解决呢？
 
答：摇瓶培养因pH等参数均与反应器有较大区别，导致摇瓶中目标产物质量与反应器上有一定差别。传统方法一般在摇瓶阶段主要关注点在目标产物产量，在反应器中做工艺优化时通过相关工艺手段调控产物质量。也可以采用Ambr15等高通量反应器代替摇瓶，因pH等参数均可控，可获得与反应器相当质量的目标产物。
 
Q3
灌流培养如何控制一定的细胞密度？
 
答：传统方案可定期取样离线测培养体系中细胞密度，根据离线测得的值计算需要抽出细胞的量及需要补充培养基的量。但该方法受限于取样频率，可能会给培养体系带来较大波动。
 
较为前沿的方法是整合在线活细胞监测探头，该探头与细胞bleed泵及补料泵做反馈控制来调节细胞密度。该方法控制比较稳定。
 
Q4
消泡剂大概应该控制在多少，不会对下游影响，加了消泡剂D0会下降比较厉害，这是为什么？
 
答：在培养过程中，消泡剂尽量少加，一般控制在100PPM以内。具体加多少会对下游产生明显影响因培养基等不同也存在差异。
 
在培养过程中，泡沫的存在，能延长气体与液体接触时间，同时能增大气体与液体接触面积，从而对DO的维持有促进作用。消泡剂的加入会消除这些促进作用，故而加消泡剂后会看到DO有一个明显下降。
 
 
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