Sapphire双模式多光谱激光成像系统在抗体药研发中的应用
全球范围内，生物药，尤其是抗体类药物，经过多年的基础研究和技术积累，已经开始迸发其生命力，成为药物领域中最有活力和前景的一个分支。在全球范围已经获批上市的抗体类抗体药至少有80多个，在新冠肺炎抗体药研发中， 现在现已确立了7个抗冠状病毒靶点，同时也是药物筛选靶点。包括：(1) 病毒配体Spike蛋白；(2) 病毒受体ACE2蛋白；(3) 毒蛋白酶PLpro(papain-like protease)；(4) Mpro(3C-like protease或main protease）；(5) 介导病毒RNA帽子的甲基化修饰的nsp16；(6) 毒转录复制相关的RdRp(RNA-dependent RNA polymerase)；(7) 和潜在的病毒用于干扰宿主免疫的X domain蛋白。另外新发现一个靶点丝氨酸蛋白酶TMPRSS2(Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶(TTSP))。新冠肺炎的靶点与抗癌药比较相对较少。
抗体药的研发策略
药物靶点筛选中需要在基因水平、转录水平和蛋白水平上进行检测
Sapphire的分辨率可达10μm 、分辨率更高、可进行DNA、蛋白阵列等扫描成像、面积可达25X25cm可进行多张芯片的扫描。
Sapphire可进行多重荧光定量Western Blot检测
定量Western Blot是RNAi干扰技术研究中必不可少的检测方法。使用定量Western Blot可以：
• 确定靶基因的敲低水平。
• 确定靶基因敲低对表型的影响，例如细胞增殖，细胞迁移，细胞周期或细胞信号通路。
★ Sapphire能够同时检测四种蛋白，大大提高了Western Blot的效率。
★ 荧光信号稳定，影响因素少，定量精准。
★ 大平台，可同时进行多张印迹膜的检测。
抗体药药效评价
抗体药在进行药效评价时，主要进行细胞凋亡，细胞增殖，毒性等等分析。In Cell Western（ICW）分析是在微孔板中进行的定量免疫荧光分析（可进行96或384孔），结合了Western印迹的特异性和ELISA的可重复性和通量。
抗体药生产和质控-HCP ELISA抗体覆盖率的检测
疫苗、抗体、重组蛋白药物等生物制品的生产主要利用某些细胞诸如非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)和中国仓鼠卵巢(CHO)细胞，大肠杆菌等，这些细胞称为宿主细胞，在纯化工艺中会有宿主细胞分泌至培养基中的蛋白质或死亡破碎细胞结构蛋白残留在生物制品中，
HCP ELISA的存在的风险：
♦ ELISA酶标板包被的抗体结合量低，会限制HCP检出限。
♦ 不是所有HCPs都可以作为抗原产生抗体，因此会有“漏检”，所以需要评估HCP ELISA抗体的覆盖率（Coverage）。
HCP ELISA抗体覆盖率的评估方法一般会采用双向电泳（two-dimensional electrophoresis,2-DE）和蛋白质免疫印迹（Western Blot，WB）技术结合的办法或者2D DIGE的方法。
Saphire扫描面积大，多达四激光光源，分辨率可在10μm-1000μm可调，通过Sapphire对2D胶进行扫描，灵敏度高，图像质量好，软件操作步骤少，实验人员上手操作快。
