荧光PCR法测猫杯状病毒的检测方法及原理

猫杯状病毒感染是猫病毒性呼吸道传染病，主要表现为上呼吸道症状，即精神沉郁、浆液性和粘液性鼻漏、结膜炎、口腔炎、气管炎、支气管炎，伴有双相热。猫杯状病毒感染是猫的多发病，发病率高，死亡率低。

这里介绍的方法是采用荧光PCR方法，可对口腔、鼻或眼结膜拭子样本中的猫杯状病毒（Feline Calic Virus，FCV）核酸片段进行定性检测，可用于临床对猫杯状病毒的辅助诊断。适用于疑似FCV感染猫的辅助诊断，检测样本为感染猫的口腔、鼻或眼结膜拭子样本。猫杯状病毒检测试剂盒（荧光PCR法）具备基线噪音小、阳性信号明显、反应性好等优点。

检测原理：猫杯状病毒检测试剂盒针对猫杯状病毒保守基因片段设计特异性引物及Taqman荧光探针，该探针能与引物扩增区域中间的一段核酸序列发生特异性结合。在PCR延伸反应中，Taq酶的外切活性将5’端荧光基团从探针上切割下来，使之游离于反应体系中，从而脱离了3’端荧光淬灭基团的屏蔽，分离后的荧光基团在机器特定光源的激发下产生荧光，再由仪器的检测单元进行检测，从而实现对FCV的特异性检测。BIOG试剂盒使用内质控体系，能够实时监测整个检测过程，有效防止假阴性结果的产生。