采用UPC2-MS/MS对华法林与普萘洛尔及其相关羟基代谢物进行对映体分离
目的
阐释合相色谱在分离具有手性中心的化合物时的分析性能。添加的三种含有手性中心的羟基代谢物（结构类似物）增加了分离的复杂性。
背景
许多候选药物及其代谢物都含有一个或多个手性中心。识别和监测可能存在的各种对映体是药物开发过程中至关重要的步骤。超临界流体色谱（SFC）是一种广为人知的分离结构相似化合物（包括结构类似物和对映体）的高效技术。此外，SFC还具有许多优势，例如分析效率高、分离速度快，以及使用的溶剂与MS兼容等。
解决方案
在本技术简报中，我们展示了利用UPC2-MS/MS华法林及其三种羟基代谢物（图1）和普萘洛尔及其三种羟基代谢物（图2）进行对映体分离和检测的简易性。
超高效合相色谱（UltraPerformance ConvergenceChromatographyTM，UPC2® ）与MS检测联用有利于母
体化合物和三种羟基代谢物的对映体分离。
研究人员利用配备ACQUITY UPC2 TrefoilTM CEL1，2.5 μm，3.0×100 mm色谱柱的ACQUITY UPC2®系
统，并以甲酸铵改性的甲醇作为共溶剂，成功完成了华法林的方法优化。通过使用线性梯度并将柱温保持在10 ℃，六种构型的羟基华法林在4.5 min内成功实现分离（图3）。研究人员利用ACQUITY UPC2 Trefoil CEL1，2.5 μm，
3.0×150 mm色谱柱，以甲酸铵改性的甲醇作为共溶剂对普萘洛尔进行了分离。在本例中，通过使用线性梯度并将柱温保持在30 ℃，六种构型的羟基普萘洛尔在14 min内成功实现分离。
总结
UPC2与MS联用有利于母体化合物和三种羟基代谢物的对映体分离。华法林、6-羟基华法林、7-羟基华法林和8-羟基华法林对映体在5 min内成功分离，普萘洛尔、4-羟基普萘洛尔、5-羟基普萘洛尔和7-羟基普萘洛尔在15 min内成功
分离。识别化合物与代谢物的不同手性构型是药物开发过程中至关重要的一步，借助超高效合相色谱可轻松实现。
