细胞转染方法、转染效率低的原因及其解决方案介绍

转染是将外源性基因导入细胞内的一种技术。随着基因与蛋白功能研究的深入，转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。转染大致可分为物理介导、化学介导和生物介导三类途径。电穿孔法、显微注射和基因枪属于通过物理方法将基因导入细胞的范例；化学介导方法很多，如经典的磷酸钙共沉淀法、脂质体转染方法和多种阳离子物质介导的技术；生物介导方法，有较为原始的原生质体转染和现在比较常用的各种病毒介导的转染技术。

 

理想的细胞转染方法应该具有转染效率高、细胞毒性小等特点。病毒介导的转染技术是目前转染效率最高的方法，同时具有细胞毒性很低的优势。但是，病毒转染方法的准备程序复杂，常常对细胞类型有很强的选择性，在一般实验室中很难普及。目前非病毒介导的转染技术中，转染效率最高的方法是以阳离子非脂性物质为主的混合物配方。该类转染物质介导的细胞转染具有广谱、细胞毒性小、性能稳定等特点，而且不受培养液中的血清和抗生素的干扰，比脂质体介导的转染方法更方便，因而在转染技术领域逐渐占据主流地位。

需要指出的是，无论采用哪种转染技术，要获得最佳的转染结果，可能都需要对转染条件进行优化。转染效果的影响因素很多，如细胞类型、细胞培养条件和生长状态、转染方法、转染操作细节等等。遇到问题，需要综合考虑。