超离应用：利用快速密度梯度形成技术优化病毒载体纯化流程

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技术背景
随着现代生物医学研究的不断深入，病毒载体作为一种强大的工具，在基因治疗和基因编辑等领域发挥着至关重要的作用。然而，病毒载体的纯化过程往往耗时且复杂，这在一定程度上限制了相关研究的进展。今天，我们就来探讨一种全新的方法——利用VTi 90垂直转子与CsCl（氯化铯）密度梯度离心技术，来加速病毒载体的纯化过程，提高实验效率。

 

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方法介绍
研究团队通过使用VTi 90垂直转子和Optima XPN超速离心机，结合CsCl密度梯度离心技术，对病毒载体纯化过程进行了优化。通过多段离心，调整离心速度和离心时间，实现了在更短时间内达到密度梯度平衡的目标。
 

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实验过程
在实验中，研究团队首先将病毒载体样品与CsCl溶液混合，然后将其加入Quick-Seal热封管中。再使用VTi 90转子进行离心，通过调整离心速度和离心时间，使样品在离心管内形成稳定的密度梯度。离心结束后，通过分馏的方式收集不同密度的样品组分，并使用折射仪测量各组分并绘制密度梯度曲线。通过比较不同实验步骤的密度梯度曲线，找到与旧步骤密度梯度曲线相同的实验条件，确保了样品条带位于相同位置。

 

 

离心结果示意图：

 

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实验结果
基于 Optima XPN超速离心机对于分段离心步骤设置的支持（在一次运行中运行多个转速步骤），研究团队最终找到了一种能够在80分钟（50+30分钟）内达到密度梯度平衡的优化方案，较之前16小时的旧步骤提升了近12倍效率。

 

 

 

1. 以更高的速度开始分离可以帮助更快地形成密度梯度。

2. 将运行速度降低足够长的时间可以:

• 与现有的(较慢的)步骤获得相同的效果，将目标条带保留在完全相同的位置。

• 平坦化密度梯度曲线，可提供更高的条带分辨率。

 

 

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结语
加速密度梯度形成、优化病毒载体纯化效率是一项具有重要意义的研究工作，不仅为病毒载体纯化领域带来了新的突破，也为广大科研工作者提供了更高效、更便捷的实验方法，从而降低了实验成本和时间成本，为相关领域的研究提供了有力支持！

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Optima X系列智能型超速离心机

 

Optima XPN系列配备益于初学者操作的 eXpert 智能软件程序，同时为密度梯度离心等方法提供强大支持。产品还具有增强型数据管理功能，完美支持客户 GMP 流程。

主要型号：Optima XPN-100 / 90 / 80

基础型号：Optima XE-100 / 90

最大转速（rpm）：100,000 / 90,000 / 80,000

最大相对离心力（xg）：802,000 / 694,000 / 548,300

 

Vti 90垂直转子

 

Vti 90垂直转子，最大相对离心力可达到645,000xg，最大转速下K因子低至6。分离沉降系数约为60s的空壳AAV颗粒，仅需80min，为分离病毒颗粒的理想选择。

• 最大RPM：90 ,000

• 最大RCF：645,000 xg

• K因子：6

• 离心管数量/体积/大小/尺寸：

  ▪ 8 x 5.1mL

  ▪ ½ x 2 in

  ▪ 13 x 51 mm

• 转头容量：40.8mL

 

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研究团队通过使用VTi 90垂直转子和Optima XPN超速离心机，结合CsCl密度