Sage Science Pippin HT 简易操作手册

 一 准备样品 
样品的前处理： 
1.  DNA 样品的离子强度要比缓冲液的低 
2.  DNA 样品是去蛋白  
3. 上样量不超过 1.5ug 
4. 了解待回收的 DNA 片段大小 
5.  20ul DNA 样品（TE 溶解）+5ul marker/上样缓冲液（3%、2%、1.5%），混匀
震荡离心。0.75%预置胶 20ulDNA 样品+5ul 上样缓冲液，marker 一个泳道直接 25ul。
 
二 编程 
Protocol Editor 界面下: 1. 选择新建 Protocol 2. 选择预制胶种类 3. 设置回收的片段大小 4. 指定参考泳道（内标/外标） 5. 默认选择“洗提完成后终止”。 

三 光学校正（Pippin HT 校正系数是 0.7） 
将光学校正板黑色一面朝下，放到泳道卡槽内，点击“校正”。每次实验前都必
须要进行光路校正。 

四 准备预制胶 
1 检查预制胶 
a 检查预制胶中缓冲液量，不足加满。 
b 检查凝胶柱是否断裂  
c 检查是否有气泡 
2 准备上样 
a 排除洗提孔后面的气泡 
b 撕掉密封条，将预制胶置于仪器槽内 
c 从上方的每个缓冲液孔中吸走 80ul 缓冲液（3%、2%、1.5%预置胶）； 或者吸
走 150ul 缓冲液（0.75%预置胶）。 
d 清空洗提孔中的缓冲液, 加入 30ul 的新鲜缓冲液 
e 用胶带封闭洗提孔 
f 检查样品孔溶液，不足时补满至 40ul 
3 连续性检查（测试电流。连续性跟温度有关系，所以缓冲液要提前从冰箱中拿
出进行室温平衡） 
五 上样 
吸掉 30ul 缓冲液，加入 25ul 样品，合上盖。 
六 运行程序 
七 回收目的片段