iCheck®定量快检仪检测花生中的黄曲霉毒素

1. 概要

黄曲霉毒素是一类真菌（如黄曲霉和寄生曲霉）的有毒代谢物，它们具有很强的致癌性，主要存在于花生、谷物、坚果、棉籽以及一些食品、动物饲料等相关产品中。天然污染的黄曲霉毒素以黄曲霉毒素B1为主，1993年黄曲霉毒素被世界卫生组织（WHO）的癌症研究机构划定为Ⅰ类致癌物，是一类毒性极强的剧毒物质。它被证明对人和动物的肝脏、肾脏等组织和器官具有很大的危害。产生黄曲霉毒素的霉菌（如黄曲霉、寄生曲霉等）遍及世界各地，黄曲霉毒素的污染可以发生在植物的生长、收获和加工、贮藏、运输等过程中，及时发现污染源是最好的预防黄曲霉毒素污染的方法。中国规定花生及其制品中黄曲霉毒素B1不得超过20μg /kg。国际CAC规定花生及其制品中黄曲霉毒素总量(AFT)不得超过15μg /kg，欧盟规定食用谷物中黄曲霉毒素总量不得超过4μg /kg，黄曲霉毒素B1不得超过2μg /kg。iCheck®黄曲霉毒素定量快检卡可以快速定量的检测花生中0-25ppb的黄曲霉毒素总量含量。

2. 黄曲霉毒素定量快检卡测试包组成

1）iCheck®黄曲霉毒素快检卡（25个）

2）AFT微孔（25个）

3）稀释缓冲液CSB-4（5mL）

4）200µL吸头（50个）

5）AFT电子标定卡（1个）  6）操作说明书

3. 试验需要的设备

1）200µL 、1000µL微量移液器（各1支）

2）iCheck® 定量快检仪(带零点校正片) 

3）多用途旋转摇床

4）计时器  5) 电子称  6）纯水，或二次蒸馏水

7）提取液：甲醇+水（70+30）

8）漏斗   9）定性滤纸  10）50mL离心管

4. 试验前的准备与仪器标定 

1）使用前将快检卡、缓冲液和待检样品恢复至室温(25℃±2℃）30分钟。

2）设备校正（建议每月进行一次）：将校正片插入定量快检仪测定室，在“设定”中进行校正。

3）设备标定：将同批号的AFT QR Code放入定量快检仪卡槽中，读入二维码。

4）根据测定样品数量，打开包装袋，取出快检卡和AFT微孔，将AFT微孔置于微孔架上。

5. 样品处理与检测

1）称取5.0g粉碎(20目过筛)的花生样品于50mL离心管中，加入25.0mL 70%甲醇水提取液，置于旋转摇床上旋转振荡提取5分钟(或用高速均质器均质1分钟，或用手剧烈振荡3分钟)，用定性滤纸过滤。

2）取120µL稀释缓冲液CSB-4于AFT微孔中，加入滤液30μL，用移液器吸打5次混匀，取100μL加入到快检卡样品孔中。

3）37℃（±2℃）反应10分钟后，立即将快检卡放入定量快检仪中，点击“分析”读数，即为样品实际浓度。

6. 结果判定

1）检测范围：0-25ppb，定量限3.0ppb。

2）此检测卡为定量快检卡，若控制线（C）无红线出现，表明快检卡失效。

3）黄曲霉毒素总量测定值大于国家或内部限量值的80%（如花生黄曲霉毒素总量测定值大于16ppb），建议重新测定一次。如果还是大于这些值，请用仪器法进行确认分析。

4）如果测定值为25ppb，请将样品提取液的滤液用70%甲醇水进行稀释，最后定量快检仪中读数乘以稀释倍数，即为样品实际浓度。

7. 注意事项

1) 快检卡在保质期内一次性使用。2-8℃冰箱保存使用前应平衡至室温(25℃±2℃）后再开袋使用。

2) 谨防快检卡受潮，铝箔包装袋受损或快检卡受潮后，检测卡不要使用。

3) 尽量不要触摸快检卡中央的白色膜。

4) 所有温育过程应避免阳光直射。 

5) 铝箔包装袋中的小包是干燥剂，不可误服。

6) 超过保质期不可使用。

 

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