标准曲线法应用案例 (RXS-200 标样稀释仪)(EL系列多功能液体操作仪)
标准曲线法应用案例
简介
标准曲线法是一种简便、快捷的定量方法。它是将标准样品配制成不同浓度的标准系列,在与待测组分相同的检测条件下,等体积准确进样,然后获得检测数据。一般做法为,以标准样品的浓度为X坐标,以仪器(如:分光光度计等)的检测数据为Y坐标,绘制标准曲线(通常为直线)。在实验中,常用该方法进行样品定量分析,一般要求标准曲线的拟合度R达到0.999。
RXS-200标样稀释仪、EL系列多功能液体操作仪-确保标准曲线的高可靠性、重复性和高精度
案例1----重金属检测
实验目的:检测样品中的重金属(Cu2+、Cr3+)的含量
应用行业:纺织行业等
实验步骤:
1. 按照下表(表一、二)要求分别将300ppm的Cu2+溶液和Cr3+溶液稀释成浓度为3ppm、15ppm、30ppm、120ppm、210ppm和30ppm的序列标准液:
表一 Cu2+溶液序列标准液
样品杯号 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
母液 |
Cu2+溶液(300ppm) |
100ul |
500ul |
1000ul |
4000ul |
7000ul |
稀释液 |
蒸馏水 |
9900ul |
9500ul |
9000ul |
6000ul |
3000ul |
浓度(300ppm) |
3ppm |
15ppm |
30ppm |
120ppm |
210ppm |
稀释比 |
1% |
5% |
10% |
40% |
70% |
表二 Cr3+溶液序列标准液
样品杯号 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
母液 |
Cr3+溶液(300ppm) |
100ul |
500ul |
1000ul |
4000ul |
7000ul |
稀释液 |
蒸馏水 |
9900ul |
9500ul |
9000ul |
6000ul |
3000ul |
浓度(300ppm) |
3ppm |
15ppm |
30ppm |
120ppm |
210ppm |
稀释比 |
1% |
5% |
10% |
40% |
70% |
2. 用荧光光谱仪检测序列标准液,分别绘制Cu2+及Cr3+标准曲线;
3. 用荧光光谱仪检测未知样品并根据标准曲线计算样品中Cu2+或Cr3+的浓度。
案例2------甲醛检测
实验目的:检测样品中甲醛的含量
应用行业:环保、建筑业等
实验步骤:
1. 按照下表(表三)要求配置甲醛系列标准液;
表三 甲醛序列标准液
管号 |
0 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
标准溶液(ml) |
0 |
0.1 |
0.2 |
0.4 |
0.6 |
0.8 |
1 |
1.5 |
2 |
吸收液(ml) |
5 |
4.9 |
4.8 |
4.6 |
4.4 |
4.2 |
4 |
3.5 |
3 |
甲醛含量(ug) |
0 |
0.1 |
0.2 |
0.4 |
0.6 |
0.8 |
1 |
1.5 |
2 |
2. 添加硫酸铁铵溶液:
向各序列标准液中添加400ul 1%硫酸铁铵溶液,摇匀,放置15min,待测;
3. 用紫外分光光度计测定各序列标准液在波长630um的吸收值;
4. 以各序列标准液中甲醛的含量为横坐标,吸收值为纵坐标绘制标准曲线,计算拟合曲线的R2和R值;
5. 用紫外分光光度计测定待测样品在波长630um的吸收值;
6. 计算待测样品的甲醛含量。
案例3------蛋白质检测
实验目的;检测样品中蛋白质的含量
应用行业:医药、生命科学等领域
实验步骤:
1. 制备标准母液:
将蛋白母液(如:SP4)稀释50倍,作为标准母液待用;
2. 制备序列标准液:
将标准母液依次稀释至原浓度的10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%和80%,
稀释后各序列标准液的总体积为1ml;
3. 用紫外分光光度计测试各序列标准液在波长280nm的吸收值;
4. 以序列标准液稀释度为横坐标,吸收值为纵坐标绘制标准曲线,计算拟合曲线R2和R的值;
5. 同样用紫外分光光度计测试各序列标准液在波长280nm的吸收值;
6. 计算待测样品中蛋白含量。
案例4-氨检测
实验目的:样品中氨的含量
应用行业:环保、建筑行业等
实验步骤:
1. 按照下表(表四)要求配置氨序列标准液:
表四
管号 |
0 |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
标准溶液(ml) |
0 |
0.5 |
1 |
3 |
5 |
7 |
10 |
吸收液(ml) |
10 |
9.5 |
9 |
7 |
5 |
3 |
0 |
氨含量(ug) |
0 |
0.5 |
1 |
3 |
5 |
7 |
10 |
2. 在各序列标准溶液中加入500ul水杨酸溶液,100ul亚硝基铁氰化钠溶液和100ul次氯酸钠溶液,混匀液体,放置室温1h,待测;
3. 用紫外分光光度计测试各序列标准液在波长697.5nm的吸收值;
4. 以序列标准液的氨含量为横坐标,吸收值为纵坐标绘制标准曲线,计算拟合曲线R2和R的值;
5. 用紫外分光光度计测定待测样品在波长697.5nm的吸收值;
6. 计算待测样品中氨含量。
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