大小鼠Von Frey测痛实验：方法精要与应用总结
Von Frey纤维，亦称纤毛机械刺激针，是一种评估皮肤触觉敏感性的工具，其应用能反映在外周或中枢敏化状态下异常疼痛的存在。该技术在疼痛研究领域跨物种应用广泛，尤其在啮齿类动物的临床前模型中，成为探索病理生理机制及新镇痛药物研发的宝贵资源。
然而，准确评估啮齿动物的疼痛感受颇具挑战性。通常，通过监测其对机械或热刺激的行为反应变化来量化疼痛敏感性。Von Frey测试便是一种具体方法，它涉及在啮齿动物身体特定区域施加精确的点状刺激，并记录触发撤回反射所需的刺激强度。这一过程采用具有特定弯曲力的校准光纤完成，主要聚焦于后爪足底，以细校准塑料丝模拟机械刺激。机械撤回阈值被定义为能够引发撤回反射的最小细丝规格，旨在评估动物对有害刺激的感知能力。一旦反应发生，所需压力以克为单位记录，作为个体的疼痛阈值指标。此外，现代电子测痛仪的引入，实现了连续施力并提供了更为精细的脚爪撤退阈值测量。
实验流程概览：
- 准备阶段：将小鼠置于高架线栅测试室内，静置一小时以适应环境。
- 测试执行：
- 将小鼠放在金属丝网上，首先测试左后爪。使用0.6g起始规格的Von Frey细丝，从网下侧轻触小鼠后爪足底，保持1-2秒接触时间。根据小鼠反应调整细丝规格，无反应则递增，有反应则递减，直至找到引发撤回或舔舐行为的细丝。重复此过程5次，每次间隔至少2分钟。
- 对右后爪重复上述测试流程。
测试阶段安排：
- 测试1：在适应环境后24小时，按照前述步骤重新测试小鼠。
- 测试2：再隔24小时（即适应后48小时），重复上述测试流程。
整个实验过程中，需多次重复测试并记录结果，特别关注药物注射前后同侧（如结扎侧）与对侧爪子在缩爪潜伏期上的变化，以ΔPWT (g)形式表示，即对侧潜伏期减去同侧潜伏期的差值，从而量化疼痛敏感性的变化。
