转染技术作为核酸药物的核心关键技术,目的是能够高效率的进行细胞转染和控制转染后的细胞毒性,选择同立海源LipidnanoTM Super RNAi 转染试剂,你关注的产品疑问,公司首席品牌官‘小海’负责给大家做相关解答~
LipidnanoTM Super RNAi 转染试剂的应用范围?
适合将siRNA和miRNA等小RNA高效地输送到广泛的细胞类型中。
LipidnanoTM Super RNAi 转染试剂与传统转染试剂明显不同的方面?
传统转染试剂可通过表面正电荷帮助 siRNA 大量摄取入胞,但入胞后 siRNA 内含体逃逸水平低,造成摄取的 siRNA 无法发挥作用,同时造成细胞毒性。本品为非强正电型脂质转染试剂,避免细胞大量摄取造成的毒性,但本品可提升细胞内吞后的 siRNA 内含体逃逸效率,通过促进内含体逃逸使更多 siRNA 释放入细胞质中实现高效基因沉默作用。故在细胞水平上通过荧光标记 siRNA 进行条件优化的方法不适用于本转染试剂。推荐使用 Western Blot 或 QPCR 方式对最佳转染浓度进行优化。
LipidnanoTM Super RNAi 转染试剂对细胞类型有限制吗?
对大多数贴壁细胞和悬浮细胞转染,部分原代细胞和转化细胞株均可使用。
对待转染细胞有什么要求?
通常健康的细胞转染效率较高,较低的传代数能确保每次实验所用细胞的稳定性。推荐用 50 代以下的细胞转染。
如何对转染效果进行评价?
细胞转染后,不同细胞和 siRNA 效率存在差异。在 mRNA 水平观察 siRNA 效果的最佳时间是转染后24-48小时,在蛋白水平观察siRNA效果的最佳时间是转染后48-72小时。siRNA干扰是非线性的,不同基因半衰期存在较大差异,首次进行 siRNA 干扰效果测定时,建议多点测定,确定最佳测定时间点。
同立海源 LipidnanoTM Super RNAi 转染试剂(货号:TL-1001)是一款高效能、非强正电型脂质转染试剂,用于siRNA介导的基因敲低实验,适合将siRNA和miRNA等小RNA高效地输送到广泛的细胞类型中。特有的超高细胞利用率,在低摄取量下即可达到高效的靶基因敲低水平,转染效果优于行业同类型竞品。
01 应用范围
① 贴壁细胞和悬浮细胞转染
② 部分原代细胞和转化细胞株的基因转染
③ siRNA高通量转染试验。
02 操作流程