利用高压微射流技术制备多西紫杉醇纳米乳

目前针对多西他赛溶解度低，吐温80 毒性等问题，国内外专家一直致力于其新剂型的研究，其中包括胶束系统、脂肪乳剂、脂质体、固体脂质纳米粒、聚合物纳米粒等。与其他剂型相比，载药脂肪乳剂具有其独特的优势：通过乳化技术（emulsion technology）将不相溶的两种液相在乳化剂的存在下用外力做功乳化，将药物包裹在内相或界面层，包封率高，可提高药物的稳定性，降低了药物毒性，确保了药物的疗效；其在营养脂肪乳基础上发展而来，具有商业化生产的可行性；其能够经受高温终端灭菌，保证了制剂的安全性。

本文将简介通过高压微射流技术制备安全、有效、低毒的多西紫杉醇纳米乳剂。

实验仪器与试剂

JA50002 型精密电子天平：上海舜宇恒平公司；

KQ5200DE 型数控超声波清洗器：昆山市超声仪器有限公司；

NanoGenizer30K 微射流超高压均质机：苏州微流纳米生物技术有限公司进口代理；

Nano ZS 型激光粒度仪：英国马尔文公司；

高剪切机：德国IKA 公司

多西他赛对照品；多西他赛原料；泊洛沙姆188；蛋黄卵磷脂Lipoid E-80；大豆油；中链脂肪酸甘油三酯MCT；油酸；氢氧化钠；甲醇；乙腈

实验方法

1.目标载药量确定
根据市售多西他赛注射液说明书，规格:0.5 mL:20 mg；1 mL:40 mg；稀释液稀释后终浓度不超过0.9 mg/mL。本研究目标多西他赛脂肪乳规格为100 mL:100 mg。以100 mL 输液袋装，临床不经稀释直接静脉输注。称取主药、磷脂适量溶于油相中，在适宜温度搅拌至完全溶解备用；另称取泊洛沙姆188 适量溶于水相中，在相同温度下搅拌至完全溶解备用；在适宜温度、高剪切力下将油相加入水相，并持续相应时间，调节pH；将初乳液通过高压微射流均质，制备1 mg/mL 多西他赛脂肪乳，离心后观察无结晶沉淀，后续以多西他赛1 mg/mL作为目标载药量进行处方工艺筛选。

2.油相制备：
制备药用乳剂的油相种类较多，但对于注射用乳剂，处于安全性考虑，其油相选择受到了严格的限制。纯化大豆油，属于长链甘油三酯类（LCT），由于其几乎无恶臭，并几乎无临床副作用，已应用于很多商业化乳剂产品。研究发现油类的结构会影响乳剂微粒注射后的体内行为。而包含长链油和中链甘油三酯的混合油不仅是很好的营养能量，并且能迅速从循环系统中清除。这些混合油类已用于商业制剂，例如Braun 产品Lipofundin MCT/LCT®。本文根据处方前研究中多西他赛在soybean oil、MCT 中的溶解度，选择soybean oil/MCT 1:4 为油相，筛选不同soybean oil/MCT 混合油用量对乳剂的影响。

3.初乳制备：
按基本处方将多西他赛、大豆磷脂溶于不同量混合油相中6 %、10 %、14 %(w/v)，恒温磁力搅拌器加热搅拌溶解，将泊洛沙姆188 溶于水相中，两者加热到相同温度60℃，在高剪切作用下将油相加入水相中，高剪切10 min 制备初乳。

4.微射流高压均质制备终乳实验方案探索：
本文采用苏州微流纳米生物技术有限公司进口代理的美国Genizer微射流高压均质机，通过Y型微射流金刚石交互容腔核心部件可以实现高效率均质及线性放大，微射流通过电动增压系统提供恒定的压力，确保每单位液滴得到相同的能量，其相对于传统阀式均质机结构，能够确保乳滴粒径分布更加均一。均质压力及均质次数两个参数是影响乳滴粒径分布的主要原因。本实验初步考察均质压力分别为10000 psi、12000 psi、15000 psi。按照优化后处方制备多西他赛乳剂，在15000 psi 条件下，考察均质次数分别为1、2、3、4、5 次对粒径及粒径分布的影响。观察外观，并进行粒径、粒径分布测定。

图1.微射流高压均质工艺示意图

图2.Nanoenizer30K微射流超高压均质机

实验结果：

初次测试处理F20Y 型号

表1.不同均质压力测试结果

由以上结果可知，乳剂平均粒径大小随着均质压力的增大呈现减小趋势，但10000psi压力时Z-average就达到130 nm 以下。换用不同型号腔体不同工艺压力和次数处理后，获得110nm PDI 0.1 D90180nm的结果。