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​移液器的工作原理及保持移液器准确度的方法

浏览次数:3129 发布日期:2022-6-8  来源:苏州阿尔法生物实验器材有限公司
实验过程中,如果没有准确的移液,您的实验数据将无法保证准确 ,并且您的分析也会有较大差异,如何保证移液器的准确度呢?
 

移液器的准确度和精确度

移液器的准确度和精确度是挑选移液器时重要指标。准确指移液量与设置量相等。精确是指多次移液结果接近一致。一般移液器会存在以下几种情况:

■ 结果准确但不精确:虽然平均移液量与设置量相符,但是单次移液结果之间互有偏差。
结果精确但不准确:移液结果之间只有微小差异,但是平均移液量与设置量相差甚远。
结果准确且精确:平均移液量与设置量相等,移液结果之间只有微小差异。
 准确度和精确度这两个术语在移液器技术参数中表现为系统误差 %(不准确度 %)和随机误差 %(不精确度 %)。值得注意的是,通常只有当匹配原厂吸头使用时技术参数才会有效。使用具有高品质、经专业维护和校准的移液器,以及合适的高品质吸头才能取得最好的准确度。另一方面,移液经验和实验室管理规范对精确度有很大的影响,比如正确的移液角度、最佳移液速度以及一致的移液节奏等因素。

为了取得高水平的准确度,应选择能够操作所涉及容量中最小容量的移液器。这一点很重要,因为排液容量接近移液器最小容量时,移液器的准确度会降低。例如,分配 10μl 的液体时,使用 1 ml 容量的移液器会产生相当差的准确度,而使用 300 μl 的移液器效果则会好一些,使用 10μl 的移液器则会产生理想的效果。
 

为了取得良好的移液结果,务必选择具有较小移液力、吸头安装力、吸头弹出力的移液器。移液力大的移液器会加速手臂和手部肌肉的疲劳,尤其是在长期移液工作期间,从而导致更为不理想的结果。所以购买移液器时您可以按照以下特点进行选择,这些都会影响到移液结果的可靠性:

■ 针对各种液体都可以轻松校准。如果设定可以保存待用也是有益的。

■ 容量调节锁定:这个功能可以防止移液时出现意外的容量改变。应特别留意该机制的可靠性、人体工学设计以及灵敏性。

■ 移液器或移液器帽的颜色标识:这可以帮助您选取正确的移液吸头。

移液器属于精密仪器,所以做好移液器的维护,解它们的工作原理,熟练掌握移液器的使用技术,才能保证移液器准确



移液器的工作原理

1. 空气置换型移液器
空气置换移液器的工作原理有点像注射器,不同之处在于活塞和样品之间有一个充气垫。气垫可防止活塞与溶液接触。将溶液和移液管分开是好的,但它也对移液器施加了一些限制。
温度和压力会影响气垫的体积,从而影响移液精度。此外,挥发性溶剂会蒸发到气垫中,从而导致分配体积不准确且低于移液器上显示的体积。
空气置换移液器的内管也容易受到移液溶液的污染。所以,尽量不要吸取腐蚀性液体。
2. 非空气置型换移液器
非空气置型换移液器也被成为容积式移液器。容积式移液器的工作原理也类似于注射器的工作,但它们没有气垫。这使得它们在移取挥发性溶剂时更准确,因为没有地方(气垫)让溶剂蒸发。这也降低了移取腐蚀性物质和生物危险材料时受到污染的机会,这使得容积式移液器更适合处理这些试剂。这种移液器一般造价昂贵,因为移液器和吸头是一个单元,移液时都需要更换。当然,还有一种办法是使用外置活塞式移液器,这种移液器可用来吸取石油等黏稠液体及挥发、腐蚀性较强的液体。比如瑞宁的 Pos-D外置活塞式移液器。

保持移液器准确度的方法:

1. 定期进行移液器的维护和保养
从理论上讲,移液器的维护保养频率应维持在,每 6-12 个月/次。这只是一个粗略的指南;根据您对准确性的要求,您需要更频繁地对其进行维修。这项工作,可以自行完成,也可以交给售后服务进行,据了解,Rainin系列移液器一般会为客户提供定期免费维护、校准移液器等售后服务。正常的移液器维护校准包括移液器的初校准、清理、给易损部件加润滑脂以及更换任何磨损的密封件或其他部件。
2. 每次实验前做好移液器的点检工作
检查移液器的前端是否有任何明显的损坏。如果出现问题,请及时报修,切勿带故障工作。
3. 每天使用前需要清洁移液器
应该用一些 70% 的乙醇擦拭移液器。
4. 使用移液器支架垂直存放移液器
以这种方式存放移液器可防止移液器桶中的任何液体进入移液器内部并导致腐蚀。
5. 切勿将移液器放在吸头有液体的一侧
使用过程中只有空气才能将液体与移液管分开。所以移液管内的任何液体都有可能导致污染,甚至会导致液体倒吸而造成严重的腐蚀损坏。
6. 保证吸头的匹配度及正确安装
在吸取和分配液体时,不匹配或安装不当的吸头会导致空气逸出,从而导致结果不准确。
7. 需要保证正确使用移液器
关于移液器使用的有关基础知识,请查看Rainin移液技术手册。移液器的正确使用需要遵循以下原则:
①移液器动作缓慢、平稳;
②吸取液体时垂直握住移液器;
③吸取液体时,只需将吸头稍微浸入液体即可。否则,您会在吸头上涂上液体,液体将随移液器内的体积一起转移; 
④分配液体时,垂直握住移液器,但使接收容器的侧壁保持 45 度角。移液器靠在侧壁上或移入已经存在的液体中。
8. 移液的准确度的预测
其实你移液器操作技术是可以检测的.具体方法如下:通过将 100 µL 分配到精细天平上来检查您的移液技术的准确性。您制作的液滴的质量应约为 0.1 克。现在重复做同样的步骤 10 次并记录你获得的质量。如果变化超过 +/-0.5%,那么您要么需要重新评估您的移液技术,要么多加练习!

苏州阿尔法生物为您提供移液器、移液器支架、外置活塞式移液器、移液器吸头等仪器耗材,更多关于移液器保养、移液器校准、移液器维护及移液器准确相关知识。
来源:苏州阿尔法生物实验器材有限公司
联系电话:0512-62956104
E-mail:jie_wu@bioalpha.cn

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