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探讨组织学石蜡与冰冻切片的优缺点

浏览次数:174 发布日期:2022-4-24  来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则责任自负
在组织学中,最常用到的有石蜡切片与冰冻切片。两者各有优缺点,在实验的应用上也有所不同,比如石蜡切片常用于进行免疫组化实验,冰冻切片常用于免疫荧光实验。而两个实验都是应用免疫学基本原理——即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂显色来确定组织细胞内蛋白质,对其进行定位、定性及相对定量的研究。

1、要求做冰冻切片的不一定能做石蜡切片。因为做石蜡切片时要高温烤片,可能会破坏组织的抗原性,如果组织 的抗原性较稳定,则可作石蜡切片;但是要求做石蜡切片的,可作冰冻切片。

2、冰冻切片的优点是能够较好的保存组织的抗原免疫活性,做免疫组化时不需抗原修复这一步。缺点是细胞内易 形成冰晶而破坏细胞结构,可能会使抗原弥散;切片厚度较石蜡的厚,做的片子没石蜡的漂亮。当你买一抗时,目 录上都写着做什么样的切片,如果它写着只能做冰冻,就不能做石蜡,如写着两者都可,那就都能做。

3、石蜡切片的优点可以保持组织细胞的形态结构,且容易存放在室温,而冰冻切片比较麻烦,一定要存在-80 度的低温冰箱中,尤其是用来做原位杂交的的切片,为了防止 RNA 降解,保存一贯很重要。由于石蜡切片可以切到 4 微米左右,所以原位杂交探针容易渗透到组织中去,容易成功,而且得到的颜色/形态都较冰冻切片好。
 
来源:上海邦景实业有限公司
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