Countstar Altair全自动细胞分析仪在细胞培养疫苗过程中的应用

一、疫苗的概述
1.什么是疫苗？
 一切通过注射和黏膜途径接种，可以诱导机体产生针对特定致病原的特异性抗体或细胞免疫，从而使机体获得保护或消灭该致病原能力的生物制品，统称为疫苗。
包括：蛋白质、多糖、核酸、活载体或感染因子等。
2.疫苗的分类和发展有哪些？

• 按所用材料分类：

      细菌性疫苗
      病毒性疫苗
      类毒素

• 按疫苗研制技术分类

      传统疫苗：灭活疫苗、减毒活疫苗、亚单位疫苗（用天然微生物的某些成分制成）
      新型疫苗：基因工程亚单位疫苗、基因工程载体疫苗（活疫苗）、核酸疫苗、基因缺失疫苗、重组疫苗、合成肽疫苗、抗独特型抗体疫苗。

• 疫苗的发展：

      晶典的病毒疫苗和细菌疫苗→寄生虫疫苗、肿瘤疫苗、避孕疫苗等；
      预防性疫苗→治疗性疫苗

• 疫苗的基本成分：抗原，佐剂，防腐剂，稳定剂，灭活剂，缓冲液、盐类等非活性成分

表1.不同疫苗特点

	灭活疫苗	减毒活疫苗	亚单位疫苗
获得方法	用化学或物理方法将病原体杀死，但让保持其免疫原性	通过实验动物传种接代的方法将强毒致弱，使毒力降低，但仍保持其免疫原性	以化学方法获得病原体的某些具有免疫原性的成分，接种后刺激机体产生特异性免疫效果
接种特点	稳定性好，比较安全，一般要接种2-3次，反应比较大，维持时间较短	稳定性较差，也存在毒力返强的危险，但接种次数少，反应小，免疫效果持久	纯度较高，副反应小，需多次接种
常见疫苗	霍乱，百日咳，伤寒，脊髓灰质炎灭活疫苗等	麻疹，鼠疫，卡介苗，脊髓灰质炎减毒活疫苗等	白喉、破伤风类毒素，A群脑膜炎球菌多糖疫苗

表2.不同年龄阶段常见接种疫苗情况

年龄段	接种疫苗
儿童	脊髓灰质炎，甲肝，肺炎，结核，麻腮风-水痘，百白破-乙肝-流感杆菌-灭活脊灰炎，轮状病毒，脑膜炎等。
青少年	乙肝-甲肝，百白破，巨噬病毒，艾滋病，衣原体，人乳头瘤病毒，EB病毒，单纯孢疹等。
成年	乙肝-甲肝，百白破，巨噬病毒，艾滋病，单纯孢疹，结核，幽门螺杆菌等。
老年人	流感，呼吸道合胞病毒，肺炎，带状孢疹等。

二、细胞培养疫苗的制备工艺
细胞培养疫苗有细胞培养灭活疫苗和细胞培养活疫苗，前者多以强毒毒株培养增殖制造，后者则用弱病毒毒株增殖生产。
其基本流程是：细胞制备→病毒接种→病毒收获→病毒灭活→合并、浓缩、纯化→检定→分装及冻干。 在工艺控制过程中，要根据生物反应器的工作体积，确定合适的细胞密度。接种到反应器后的细胞密度一定要合适，密度过高，容易导致基质不均匀，细胞生长不同步，凋亡快；密度过低，空间利用率低，细胞生长到一定规模需要更长的时间，难以保证细胞代次。
 
三、Countstar Altair全自动细胞分析仪在疫苗行业中的应用
细胞培养疫苗的整个过程中，都需要对细胞的浓度和活率进行质控，如细胞复苏、传代、种子扩增时，都要确定细胞生长状态、细胞密度和活性，以计数传代比例。Countstar Altair全自动细胞分析仪利用台盼蓝排斥方法，结合先进的光学成像技术和智能图像识别技术，一步操作即可获得细胞总数，浓度，活率，直径，结团率等信息。Countstar Altair适用于工业生产，采用一体机设计，无需外接电脑，其软件数据管理和控制性能完全符合FDA CFR 21 Part11，同时提供完整的IQ/OQ/PQ验证方案及文件，满足现代生物制药工业的需求，应用在工业开发、工业生产、质量控制等多方面。 它的核心优点有：
1.一体机设置，操作智能化
（1）全触屏，APP操作平台，三步完成，让你轻松检测细胞样品。如图4
（2）同时可检测五个样品，每个样品自动采集三个视野并算出平均值，快速而便捷，如图5.1和5.2。
  （3）多种数据导出格式，包括JPEG、EXCEL、PDF等格式，根据实际需要导出各类结果，满足不同的目的，如图6.1、6.2和6.3。 （4）可以绘制细胞生长曲线，如图7
2.测定结果准确性和稳定性
Countstar Altair 对光学系统进行了优化并独创“定焦”设计，避免手动调焦可能带来的测量数值变化；大样本采样量有效地减少了统计学误差，保证分析结果的准确；仪器与仪器之间，细胞计数板与计数板之间，CV值＜5%，如图8.1、8.2和8.3。
3. 仪器本身的合规性
（1）符合FDA 21 CFR Part11法规，有多级权限管理和电子签名等功能，如图9.1和9.2。 （2）满足GMP规定，可以提供IQ、OQ、PQ验证服务
Countstar产品是免维护的仪器，可以定期通过标准颗粒对仪器的稳定性和准确性进行校准，我们提供8种颗粒，包含3种浓度颗粒，3种活率颗粒以及2种直径颗粒，可以完成对仪器全方位的校准以及验证，确保仪器的性能符合要求，如图10。

  4.网络连接，中央数据管理
Countstar Altair可以连接网络，与服务器对接，实现数据的实时上传，进行中央数据的管理，如图11.1和图11.2。
  小结
在疫苗行业中，摸索细胞的培养条件、改进培养工艺是细胞制药研发的重要阶段，Countstar Altair全自动细胞分析仪能够快速检测细胞的浓度、活率、直径等，并提供高清的细胞图片，为改进细胞的培养工艺提供可靠的数据支持。Countstar Altair符合cGMP法规，能够准确有效地检测细胞的状态，保证疫苗的产量和质量。