Countstar Rigel S3 荧光细胞分析仪特点及免疫治疗领域的应用

三步法:
Countstar® Rigel系统通过简单的三步操作，仅需20微升样品，即可从样品到结果，每个计数样本都会自动显示细胞总数、浓度和平均直径等信息。+结果显示界面。

快速和稳定的检测结果
Countstar® Rigel系统可以一次自动检测5个样品，这样可以大大提高检测效率和降低成本。同时结合专利的“固定焦距”，结果会更加稳定和可靠。

符合GMP要求以及FDA 21 CFR Part 11
Countstar® Rigel系统是为了满足现代制药需求而设计。软件符合21 CFR Part 11，包括电子签名，电子记录，审计追踪功能等。于此同时，我们提供IQ/OQ服务以及PQ支持，帮助用户建立一个可靠的检测系统。

用户友好和灵活的软件系统
APP式管理，每一个实验类型可以被复制，不同的项目和不同的操作者可以有独立的实验类型，数据会按照APP进行分类，这样可以使数据管理的工作大大简化。Countstar® Rigel的软件可以自动生成PDF报告。报告包含有关记录数据的最关键信息的摘要。

4.Countstar® Rigel在免疫治疗领域的应用
免疫疗法，如CAR-T治疗包括从病人收集外周血单核细胞（PBMC），然后分离所需的T细胞亚群，通过基因改造产生工程CAR-T细胞，CAR-T细胞在体外大规模扩增后再回输到患者。 Countstar® Rigel系统可以对整个CAR-T生产过程中细胞浓度，活率进行监测，并且符合GMP的要求。

AO/PI双荧光法检测活率：
吖啶橙和碘化丙啶是可以和细胞核核酸结合的荧光染料。AO可以穿透活细胞和死细胞对细胞核进行染色并发出绿色荧光，PI进入死细胞对细胞和进行染色并发出红色荧光。因此AO/PI为细胞核染料，可以准确区分活细胞与死细胞，而且可以排除杂质或者非特异细胞的干扰，进行精准的浓度活率检测。

T/NK 细胞介导的细胞毒性

CAR-T疗法，用基因工程的方法对T细胞进行基因改造以产生可以直接和靶标肿瘤细胞结合并攻击的CAR-T细胞。

对靶标细胞用无毒的无放射性的钙黄绿素进行标记（或者GFP转染标记），我们可以观察CAR-T细胞对肿瘤细胞杀伤效应。活的肿瘤细胞会含有钙黄绿素或者GFP，死的肿瘤细胞不含有钙黄绿素或者GFP。Hoechst33342被用来染色所有的细胞（包含T细胞和肿瘤细胞），PI用来染色所有的死细胞（包含T细胞和肿瘤细胞）。这种染色策略可以让我们对细胞进行精准的区分。

细胞毒性％=（对照组的活细胞数 – 实验组的活细胞数）/（对照组的活细胞数x 100）
E：T比率对K562的细胞毒性研究
随着E：T比率增加，所得荧光图像显示Hoechst + CFSE + PI +靶细胞的增加

细胞凋亡：
细胞凋亡的测定是通过测量细胞早期凋亡激活的标记来了解细胞如何死亡。这些是凋亡细胞的特定生物化学和形态学标记，而在正常细胞和坏死细胞中不发生的此变化。使用Countstar FL通过Hoechst 33342，AnnexinV-FITC，PI标记细胞, 可以将细胞分成不同的阶段。该Counstar软件可以通过直接计数提供即时结果。

GFP转染
GFP可通过转基因技术引入动物细胞或其他微生物。 Countstar Rigel S3为检测GFP转染提供了一种快速简便的检测方法。用Hoechst 33342和碘化丙啶（PI）染色来确定总细胞群和死细胞群以及检测表达GFP的群体。该软件可以通过直接计数给出即时结果（包括GFP阳性百分比，浓度和活率）

台盼蓝细胞浓度和活率分析
Countstar® Rigel也可以通过台盼蓝染色法对细胞进行活率和浓度的测定。这里显示的是细胞系的放大代表图像。由于所有细胞都用台盼蓝染色，显示细胞台盼蓝染色图像以及Countstar S1细胞识别图像。