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Western样品制备方法简介

浏览次数:1179 发布日期:2015-5-4  来源:本站 仅供参考,谢绝转载,否则责任自负

一、细胞抗原和组织抗原样品的制备

1、细胞抗原的处理方法
向收集到的细胞中加入RIPA裂解缓冲液(蛋白酶抑制剂在使用前加入,终浓度为2ug/ml)在冰上裂解30-60min,然后再插入冰盒进行超声,超声强度以不产生泡沫为宜,超声每次2-3s,重复3或4次,12000g离心3-5min,吸取上清备用。

2、 组织抗原的处理方法
将组织从动物体内取出(样品不宜反复冻融),取少量(1-2g)放入玻璃匀浆器中研磨成匀浆,然后转入微量离心管中进行超声,超声强度以不产生泡沫为准,超声每次5-7s,重复5或6次,再12000r/min,离心3-5min,吸取上清备用。
上述两种方法得来的样品处理液还要加入1/4体积左右的电泳上样缓冲液,然后放在沸水浴中加热3-4min使蛋白质变性,方可作为样品准备行凝胶电泳。

二、其他样品的制备

细菌抗原、分泌上清样品、经抽提纯化的蛋白质样品可以直接加入电泳上样缓冲液,然后在沸水浴中加热3-4min使蛋白质变性。

Western样品制备必备品

厂商

目录号

产品名称

规格

目录价

Liankebio

LK-WB018

PMSF (100mM)

1 g

60

Liankebio

LK-WB019

RIPA裂解液

100ml

150

Liankebio

LK-WB004

SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)

1 ml*2

30

阅读原文:http://www.liankebio.com/ProductCenterShow/articleID/2015050004.html

来源:杭州联科生物技术股份有限公司
联系电话:4006721600
E-mail:network@liankebio.com

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