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在甲基转移酶的催化下,DNA的CG两个核苷酸的胞嘧啶被选择性地添加甲基,形成5-甲基胞嘧啶,这常见于基因的5''-CG-3''序列
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BSP甲基化检测
一.DNA甲基化简介
在甲基转移酶的催化下,DNA的CG两个核苷酸的胞嘧啶被选择性地添加甲基,形成5-甲基胞嘧啶,这常见于基因的5'-CG-3'序列。DNA甲基化导致某些区域DNA构象发生变化,从而影响了蛋白质与DNA的相互作用,且达到一定程度时将导致基因失活。
亚硫酸氢盐处理后测序(bisulfite sequencing PCR,BSP)法是检测基因甲基化的经典方法,其原理为:用亚硫酸氢钠修饰处理基因组DNA,所有未发生甲基化的胞嘧啶(C)被转化为尿嘧啶(U)而甲基化的胞嘧啶则不变。
二.服务要求
1、提供的样品
提供细胞(≥106 个)、组织(≥300mg)、血液(≥1ml)、血清(≥1.5ml)等样品材料,基因组DNA(体积≥50μl,浓度≥50 ng/μl)。
2、提供详细的样本信息
三.订购信息
服务名称 |
服务内容 |
周期 |
报价 |
DNA提取 |
新鲜组织、血液、细胞 |
1周 |
询价 |
引物设计 |
设计、合成 |
1周 |
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BSP克隆测序法 |
甲基化修饰、PCR扩增、克隆、测序 |
3-4周 |
四.报告内容
实验方法,步骤,所用试剂,仪器,引物序列、电泳图片、测序峰图、阳性克隆质粒;保留剩余引物和模板。